uridine 5'-diphosphoglucuronic acid triammonium salt | 63700-19-6

• 物质功能分类: 生物化工 - 核酸类
• 分子结构分类: 有机化合物 - 核苷、核苷酸和类似物 - 嘧啶核苷酸
• 英文名称: uridine 5'-diphosphoglucuronic acid triammonium salt
• 英文别名: Uridine diphospho-D-glucuronic acid triammonium salt；Udp-D-glucuronide ammonium salt；azane;(2S,3S,4S,5R,6R)-6-[[[(2R,3S,4R,5R)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid
• CAS: 63700-19-6
• 化学式: C₁₅H₂₂N₂O₁₈P₂*3H₃N
• 分子量: 631.381
• InChiKey: WMWKTCPGFOEPBD-YGIWDPDDSA-N

物化性质

• 熔点：
  >175oC (dec.)
• 溶解度：
  H2O：10 mg/mL，澄清，无色
• 稳定性/保质期：
  远离氧化物。

计算性质

• 辛醇/水分配系数(LogP)：
  -4.54
• 重原子数：
  38
• 可旋转键数：
  9
• 环数：
  3.0
• sp3杂化的碳原子比例：
  0.67
• 拓扑面积：
  310
• 氢给体数：
  10
• 氢受体数：
  19

安全信息

• 安全说明：
  S22,S24/25
• WGK Germany：
  3
• 危险性防范说明：
  P261,P280,P301+P312,P302+P352,P305+P351+P338
• 危险性描述：
  H302,H315,H319,H335
• 储存条件：
  存放在密封容器中，并置于阴凉、干燥处。请将储藏地点远离氧化剂。建议在-20°C下保存。

SDS

1.1 产品标识符
: 尿苷-5′-二磷酸葡糖醛酸 三钠盐
产品名称
1.2 鉴别的其他方法
Uridine-diphosphate-glucuronic acidtrisodium salt
Uridine[5′]diphospho[1]-α-D-glucopyranosuronic acidtrisodium salt
UDP-GlcA
UDPGA
1.3 有关的确定了的物质或混合物的用途和建议不适合的用途
仅供科研用途，不作为药物、家庭备用药或其它用途。

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模块 2. 危险性概述
2.1 GHS分类
根据化学品全球统一分类与标签制度(GHS)的规定，不是危险物质或混合物。
当心 - 物质尚未完全测试。
2.3 其它危害物 - 无

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模块 3. 成分/组成信息
3.1 物 质
: Uridine-diphosphate-glucuronic acidtrisodium salt
别名
Uridine[5′]diphospho[1]-α-D-glucopyranosuronic acidtrisodium salt
UDP-GlcA
UDPGA
: C15H19N2Na3O18P2
分子式
: 646.23 g/mol
分子量
无

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模块 4. 急救措施
4.1 必要的急救措施描述
吸入
如果吸入,请将患者移到新鲜空气处。 如果停止了呼吸,给于人工呼吸。
皮肤接触
用肥皂和大量的水冲洗。
眼睛接触
用水冲洗眼睛作为预防措施。
食入
切勿给失去知觉者从嘴里喂食任何东西。 用水漱口。
4.2 主要症状和影响，急性和迟发效应
4.3 及时的医疗处理和所需的特殊处理的说明和指示
无数据资料

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模块 5. 消防措施
5.1 灭火介质
灭火方法及灭火剂
用水雾,耐醇泡沫,干粉或二氧化碳灭火。
5.2 源于此物质或混合物的特别的危害
碳氧化物, 氮氧化物, 磷的氧化物, 钠的氧化物
5.3 给消防员的建议
如必要的话,戴自给式呼吸器去救火。
5.4 进一步信息
无数据资料

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模块 6. 泄露应急处理
6.1 人员的预防,防护设备和紧急处理程序
防止粉尘的生成。 防止吸入蒸汽、气雾或气体。
6.2 环境保护措施
不要让产物进入下水道。
6.3 抑制和清除溢出物的方法和材料
扫掉和铲掉。 存放进适当的闭口容器中待处理。
6.4 参考其他部分
丢弃处理请参阅第13节。

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模块 7. 操作处置与储存
7.1 安全操作的注意事项
在有粉尘生成的地方,提供合适的排风设备。
7.2 安全储存的条件,包括任何不兼容性
贮存在阴凉处。 容器保持紧闭，储存在干燥通风处。
建议的贮存温度： -20 °C
7.3 特定用途
无数据资料

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模块 8. 接触控制和个体防护
8.1 容许浓度
最高容许浓度
没有已知的国家规定的暴露极限。
8.2 暴露控制
适当的技术控制
常规的工业卫生操作。
个体防护设备
眼/面保护
请使用经官方标准如NIOSH (美国) 或 EN 166(欧盟) 检测与批准的设备防护眼部。
皮肤保护
所选择的保护手套必须符合EU的89/686/EEC规定和从它衍生出来的EN 376标准。
戴手套取 手套在使用前必须受检查。
请使用合适的方法脱除手套(不要接触手套外部表面),避免任何皮肤部位接触此产品.
使用后请将被污染过的手套根据相关法律法规和有效的实验室规章程序谨慎处理. 请清洗并吹干双手
身体保护
根据危险物质的类型，浓度和量，以及特定的工作场所来选择人体保护措施。,
防护设备的类型必须根据特定工作场所中的危险物的浓度和含量来选择。
呼吸系统防护
不需要保护呼吸。如需防护粉尘损害，请使用N95型（US）或P1型（EN 143)防尘面具。
呼吸器使用经过测试并通过政府标准如NIOSH（US）或CEN（EU）的呼吸器和零件。

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模块 9. 理化特性
9.1 基本的理化特性的信息
a) 外观与性状
形状: 粉末
颜色: 白色
b) 气味
无数据资料
c) 气味阈值
无数据资料
d) pH值
无数据资料
e) 熔点/凝固点
无数据资料
f) 起始沸点和沸程
无数据资料
g) 闪点
无数据资料
h) 蒸发速率
无数据资料
i) 易燃性(固体,气体)
无数据资料
j) 高的/低的燃烧性或爆炸性限度 无数据资料
k) 蒸汽压
无数据资料
l) 蒸汽密度
无数据资料
m) 相对密度
无数据资料
n) 水溶性
无数据资料
o) n-辛醇/水分配系数
无数据资料
p) 自燃温度
无数据资料
q) 分解温度
无数据资料
r) 粘度
无数据资料

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模块 10. 稳定性和反应活性
10.1 反应性
无数据资料
10.2 稳定性
无数据资料
10.3 危险反应的可能性
无数据资料
10.4 应避免的条件
无数据资料
10.5 不兼容的材料
强氧化剂
10.6 危险的分解产物
其它分解产物 - 无数据资料

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模块 11. 毒理学资料
11.1 毒理学影响的信息
急性毒性
无数据资料
皮肤刺激或腐蚀
无数据资料
眼睛刺激或腐蚀
无数据资料
呼吸道或皮肤过敏
无数据资料
生殖细胞突变性
无数据资料
致癌性
IARC:
此产品中没有大于或等于 0。1%含量的组分被 IARC鉴别为可能的或肯定的人类致癌物。
生殖毒性
无数据资料
特异性靶器官系统毒性（一次接触）
无数据资料
特异性靶器官系统毒性（反复接触）
无数据资料
吸入危险
无数据资料
潜在的健康影响
吸入 吸入可能有害。 可能引起呼吸道刺激。
摄入 如服入是有害的。
皮肤 如果通过皮肤吸收可能是有害的。 可能引起皮肤刺激。
眼睛 可能引起眼睛刺激。
附加说明
化学物质毒性作用登记: 无数据资料

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模块 12. 生态学资料
12.1 生态毒性
无数据资料
12.2 持久存留性和降解性
无数据资料
12.3 潜在的生物蓄积性
无数据资料
12.4 土壤中的迁移性
无数据资料
12.5 PBT 和 vPvB的结果评价
无数据资料
12.6 其它不利的影响
无数据资料

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模块 13. 废弃处置
13.1 废物处理方法
产品
将剩余的和未回收的溶液交给处理公司。
受污染的容器和包装
作为未用过的产品弃置。

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模块 14. 运输信息
14.1 联合国危险货物编号
欧洲陆运危规: - 国际海运危规: - 国际空运危规: -
14.2 联合国（UN）规定的名称
欧洲陆运危规: 非危险货物
国际海运危规: 非危险货物
国际空运危规: 非危险货物
14.3 运输危险类别
欧洲陆运危规: - 国际海运危规: - 国际空运危规: -
14.4 包裹组
欧洲陆运危规: - 国际海运危规: - 国际空运危规: -
14.5 环境危险
欧洲陆运危规: 否 国际海运危规 海运污染物: 否 国际空运危规: 否
14.6 对使用者的特别提醒
无数据资料
参见发票或包装条的反面。

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模块 15 - 法规信息
N/A

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模块16 - 其他信息
N/A

制备方法与用途

尿苷二磷酸葡糖醛酸是一种糖核苷酸衍生物，可用作医药原料。在生物界中，UDP-葡萄糖醛酸三钠盐是合成必需的糖缀合物的关键前体，包括哺乳动物的糖胺聚糖、植物细胞壁多糖以及细菌胶囊糖甘油脂等。

反应信息

• 作为反应物：
  描述：

  东莨菪内酯 、 uridine 5'-diphosphoglucuronic acid triammonium salt 在 human UDP-glucuronosyltransferase1A₁₀ 、 magnesium chloride 作用下， 以 二甲基亚砜 为溶剂， 反应 0.33h， 生成 scopoletin glucuronide
  参考文献：
  名称：

  Phenylalanine 93 of the human UGT1A10 plays a major role in the interactions of the enzyme with estrogens

  摘要：

  Little is currently known about the substrate binding site of the human UDP-glucuronosyltransferases (UGTs) and the structural elements that affect their complex substrate selectivity. In order to further understand and extend our earlier findings with phenylalanines 90 and 93 of UGT1A10, we have replaced each of them with Gly, Ala, Val, Leu, Ile or Tyr, and tested the activity of the resulting 12 mutants toward eight different substrates. Apart from scopoletin glucuronidation, the F90 mutants other than F90L were nearly inactive, while the F93 mutants' activity was strongly substrate dependent. Hence, F93L displayed high entacapone and 1-naphthol glucuronidation rates, whereas F93G, which was nearly inactive in entacapone glucuronidation, was highly active toward estradiol, estriol and even ethinylestradiol, a synthetic estrogen that is a poor substrate for the wild-type UGT1A10. Kinetic analyses of 4-nitrophenol, estradiol and ethinylestradiol glucuronidation by the mutants that catalyzed the respective reactions at considerable rates, revealed increased K-m, values for 4-nitrophenol and estradiol in all the mutants, whilst the K-m values of F93G and F93A for ethinylestradiol were lower than in control UGT1A10. Based on the activity results and a new molecular model of UGT1A10, it is suggested that both F90 and F93 are located in a surface helix at the far end of the substrate binding site. Nevertheless, only F93 directly affects the selectivity of UCT1A10 toward large and rigid estrogens, particularly those with substitutions at the D ring. The effects of F93 mutations on the glucuronidation of smaller or less rigid substrates are indirect, however. (C) 2011 Elsevier Inc. All rights reserved.

  DOI：

  10.1016/j.steroids.2011.07.017
• 作为试剂：
  描述：

  {3-[2-tert-butylsulfanylmethyl-4-(2,2-dimethyl-propionylamino)-phenoxy]-4-methoxy-phenyl}-acetic acid 在 uridine 5'-diphosphoglucuronic acid triammonium salt 、 NADPH 作用下， 反应 1.0h， 生成 {3-[2-tert-butylsulfanylmethyl-4-(2,2-dimethyl-propionylamino)-phenoxy]-4-hydroxy-phenyl}-acetic acid 、 {3-[4-(2,2-Dimethyl-propionylamino)-2-(2-methyl-propane-2-sulfinylmethyl)-phenoxy]-4-methoxy-phenyl}-acetic acid 、 {3-[4-(2,2-Dimethyl-propionylamino)-2-(2-methyl-propane-2-sulfinylmethyl)-phenoxy]-4-hydroxy-phenyl}-acetic acid 、 {3-[4-(2,2-Dimethyl-propionylamino)-2-(2-methyl-propane-2-sulfonylmethyl)-phenoxy]-4-methoxy-phenyl}-acetic acid
  参考文献：
  名称：

  [EN] DP2 ANTAGONIST AND USES THEREOF
  [FR] ANTAGONISTE DU DP2 ET SES UTILISATIONS

  摘要：

  公开号：

  WO2011085033A3

文献信息

• UDP-Glucuronic Acid Binds First and the Aglycone Substrate Binds Second to Form a Ternary Complex in UGT1A9-Catalyzed Reactions, in Both the Presence and Absence of Bovine Serum Albumin
  作者：Nenad Manevski、Jari Yli-Kauhaluoma、Moshe Finel

  DOI：10.1124/dmd.112.047746

  日期：2012.11

  The presence of bovine serum albumin (BSA) largely modulates the enzyme kinetics parameters of the human UDP-glucuronosyltransferase (UGT) 1A9, increasing both the apparent aglycone substrate affinity of the enzyme and its limiting reaction velocity ( Drug Metab Dispos 39: 2117–2129, 2011). For a better understanding of the BSA effects and an examination of whether its presence changes the catalytic mechanism, we have studied the enzyme kinetics of 4-methylumbelliferone glucuronidation by UGT1A9 in the presence and absence of 0.1% BSA, using bisubstrate enzyme kinetic experiments, in both the forward and reverse directions, as well as product and dead-end inhibition. The combined results strongly suggest that the reaction mechanism of UGT1A9, and presumably other human UGTs as well, involves the formation of a compulsory-order ternary-complex, with UDP-α-d-glucuronic acid (UDPGA) as the first binding substrate. Based on the enzyme kinetic parameters measured for the forward and reverse reactions, the equilibrium constant of the overall reaction was calculated ( K eq = 574) and the relative magnitudes of the reaction rate constants were elucidated. The inclusion of BSA in the bisubstrate kinetic experiments quantitatively changed the apparent enzyme kinetic parameters, presumably by removing internal inhibitors that bind to the binary enzyme-UDPGA (E-UDPGA) complex, as well as to the ternary E-UDPGA-aglycone complex. Nevertheless, the underlying compulsory-order ternary-complex mechanism with UDPGA binding first is the same in both the absence and presence of BSA. The results offer a novel understanding of UGT enzyme kinetic mechanism and BSA effects.

  牛血清白蛋白(BSA)的存在显著调节了人尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸基转移酶(UGT) 1A9的酶动力学参数，增加了酶对糖苷配基底物的表观亲和力及其极限反应速度(Drug Metab Dispos 39: 2117–2129, 2011)。为了更好地理解BSA效应并检验其存在是否改变催化机制，我们通过双底物酶动力学实验，分别在正反两个方向以及产物和死端抑制的条件下，研究了在0.1% BSA存在与否的情况下，UGT1A9对4-甲基伞形酮葡萄糖苷酸化的酶动力学。综合结果强烈表明，UGT1A9反应机制，以及可能其他人类UGT也是如此，涉及形成一个强制顺序的三元复合物，其中UDP-α-d-葡萄糖醛酸(UDPGA)是第一个结合的底物。根据测得的正反反应的酶动力学参数，计算出整个反应的平衡常数(Keq = 574)并阐明了反应速率常数的相对大小。在双底物动力学实验中加入BSA，通过去除与二元酶-UDPGA(E-UDPGA)复合物以及三元E-UDPGA-糖苷配基复合物结合的内部抑制剂，定量地改变了表观酶动力学参数。然而，无论BSA是否存在，其基础的强制顺序三元复合物机制以及UDPGA首先结合的情况是相同的。这些结果为我们提供了一种新的理解UGT酶动力学机制及BSA效应的视角。
• Regiospecificity and Stereospecificity of Human UDP-Glucuronosyltransferases in the Glucuronidation of Estriol, 16-Epiestriol, 17-Epiestriol, and 13-Epiestradiol
  作者：Nina Sneitz、Mikko Vahermo、Johanna Mosorin、Liisa Laakkonen、Donald Poirier、Moshe Finel

  DOI：10.1124/dmd.112.049072

  日期：2013.3

  The glucuronidation of estriol, 16-epiestriol, and 17-epiestriol by the human UDP-glucuronosyltransferases (UGTs) of subfamilies 1A, 2A, and 2B was examined. UGT1A10 is highly active in the conjugation of the 3-OH in all these estriols, whereas UGT2B7 is the most active UGT toward one of the ring D hydroxyls, the 16-OH in estriol and 16-epiestriol, but the 17-OH in 17-epiestriol. Kinetic analyses indicated that the 17-OH configuration plays a major role in the affinity of UGT2B7 for estrogens. The glucuronidation of the different estriols by the human liver and intestine microsomes reflects the activity of UGT1A10 and UGT2B7 in combination with the tissues’ difference in UGT1A10 expression. The UGT1A10 mutant 1A10-F93G exhibited much higher V max values than UGT1A10 in estriol and 17-epiestriol glucuronidation, but a significantly lower value in 16-epiestriol glucuronidation. To this study on estriol glucuronidation we have added experiments with 13-epiestradiol, a synthetic estradiol in which the spatial arrangement of the methyl on C18 and the hydroxyl on C17 is significantly different than in other estrogens. In comparison with estradiol glucuronidation, the C13 configuration change decreases the turnover of UGTs that conjugate the 3-OH, but increases it in UGTs that primarily conjugate the 17-OH. Unexpectedly, UGT2B17 exhibited similar conjugation rates of both the 17-OH and 3-OH of 13-espiestradiol. The combined results reveal the strong preference of UGT1A10 for the 3-OH of physiologic estrogens and the equivalently strong preference of UGT2B7 and UGT2B17 for the hydroxyls on ring D of such steroid hormones.

  检查了亚家族 1A、2A 和 2B 的人 UDP-葡萄糖醛酸基转移酶 (UGT) 对雌三醇、16-表三醇和 17-表三醇的葡萄糖醛酸化。 UGT1A10 在所有这些雌三醇中的 3-OH 缀合中具有高度活性，而 UGT2B7 是对 D 环羟基之一（雌三醇和 16-表三醇中的 16-OH）最活跃的 UGT，但 17 中的 17-OH -表三醇。动力学分析表明，17-OH构型在UGT2B7与雌激素的亲和力中起主要作用。人肝和肠微粒体对不同雌三醇的葡萄糖醛酸化反映了UGT1A10和UGT2B7的活性以及组织中UGT1A10表达的差异。 UGT1A10突变体1A10-F93G在雌三醇和17-表三醇葡萄糖醛酸化中表现出比UGT1A10高得多的V max 值，但在16-表三醇葡萄糖醛酸化中表现出显着较低的值。在这项关于雌三醇葡萄糖醛酸化的研究中，我们添加了 13-表雌二醇的实验，这是一种合成雌二醇，其中 C18 上的甲基和 C17 上的羟基的空间排列与其他雌激素显着不同。与雌二醇葡萄糖醛酸化相比，C13构型变化降低了缀合3-OH的UGT的周转率，但增加了主要缀合17-OH的UGT的周转率。出乎意料的是，UGT2B17 表现出与 13-espiestradiol 的 17-OH 和 3-OH 相似的缀合率。综合结果揭示了UGT1A10对生理雌激素的3-OH的强烈偏好，以及UGT2B7和UGT2B17对此类类固醇激素的环D上的羟基的同样强烈的偏好。
• Glucuronidation of Psilocin and 4-Hydroxyindole by the Human UDP-Glucuronosyltransferases
  作者：Nenad Manevski、Mika Kurkela、Camilla Höglund、Timo Mauriala、Michael H. Court、Jari Yli-Kauhaluoma、Moshe Finel

  DOI：10.1124/dmd.109.031138

  日期：2010.3

  We have examined the glucuronidation of psilocin, a hallucinogenic indole alkaloid, by the 19 recombinant human UDP-glucuronosyltransferases (UGTs) of subfamilies 1A, 2A, and 2B. The glucuronidation of 4-hydroxyindole, a related indole that lacks the N,N -dimethylaminoethyl side chain, was studied as well. UGT1A10 exhibited the highest psilocin glucuronidation activity, whereas the activities of UGTs 1A9, 1A8, 1A7, and 1A6 were significantly lower. On the other hand, UGT1A6 was by far the most active enzyme mediating 4-hydroxyindole glucuronidation, whereas the activities of UGTs 1A7–1A10 toward 4-hydroxyindole resembled their respective psilocin glucuronidation rates. Psilocin glucuronidation by UGT1A10 followed Michaelis-Menten kinetics in which psilocin is a low-affinity high-turnover substrate ( K m = 3.8 mM; V max = 2.5 nmol/min/mg). The kinetics of psilocin glucuronidation by UGT1A9 was more complex and may be best described by biphasic kinetics with both intermediate ( K m1 = 1.0 mM) and very low affinity components. The glucuronidation of 4-hydroxyindole by UGT1A6 exhibited higher affinity ( K m = 178 μM) and strong substrate inhibition. Experiments with human liver and intestinal microsomes (HLM and HIM, respectively) revealed similar psilocin glucuronidation activity in both samples, but a much higher 4-hydroxyindole glucuronidation rate was found in HLM versus HIM. The expression levels of UGTs 1A6–1A10 in different tissues were studied by quantitative real-time-PCR, and the results, together with the activity assays findings, suggest that whereas psilocin may be subjected to extensive glucuronidation by UGT1A10 in the small intestine, UGT1A9 is likely the main contributor to its glucuronidation once it has been absorbed into the circulation.

  我们研究了 19 个重组人 UDP-葡萄糖醛酸转移酶（UGTs）1A、2A 和 2B 亚家族对致幻吲哚生物碱--西洛金的葡萄糖醛酸化作用。此外，还研究了缺乏 N,N-二甲基氨基乙基侧链的相关吲哚--4-羟基吲哚的葡萄糖醛酸化作用。UGT1A10 的西洛新葡糖醛酸化活性最高，而 UGT1A9、1A8、1A7 和 1A6 的活性则明显较低。另一方面，UGT1A6 是迄今为止介导 4- 羟基吲哚葡萄糖醛酸化活性最高的酶，而 UGTs 1A7-1A10 对 4- 羟基吲哚的活性与它们各自的西洛辛葡萄糖醛酸化率相似。UGT1A10 的茜洛辛葡糖醛酸化作用遵循 Michaelis-Menten 动力学，其中茜洛辛是一种低亲和力、高周转的底物（K m = 3.8 mM；V max = 2.5 nmol/min/mg）。UGT1A9 对 psilocin 葡萄糖醛酸化作用的动力学过程更为复杂，用双相动力学来描述最为恰当，其中既有中间成分（K m1 = 1.0 mM），也有亲和力极低的成分。UGT1A6 对 4- 羟基吲哚的葡萄糖醛酸化作用表现出较高的亲和力（K m = 178 μM）和较强的底物抑制作用。用人肝脏微粒体和肠道微粒体（分别为 HLM 和 HIM）进行的实验显示，两种样本中的西洛金葡糖醛酸化活性相似，但 HLM 和 HIM 中的 4-羟基吲哚葡糖醛酸化率要高得多。通过实时定量聚合酶链式反应（real-time-PCR）研究了 UGTs 1A6-1A10 在不同组织中的表达水平，研究结果与活性测定结果表明，虽然西洛辛在小肠中可能会被 UGT1A10 进行广泛的葡萄糖醛酸化反应，但当其被吸收进入血液循环后，UGT1A9 可能是其葡萄糖醛酸化反应的主要贡献者。
• An enzymatic synthesis of glucuronides of azetidinone-based cholesterol absorption inhibitors
  作者：Paul Reiss、Duane A. Burnett、Aleksey Zaks

  DOI：10.1016/s0968-0896(99)00151-0

  日期：1999.10

  Two derivatives, 1 and 3, of a novel cholesterol absorption inhibitor, Sch 58235. were glucuronidated with the help of glucuronyl transferases derived from bovine and dog liver microsomes. An efficient procedure for the iodination of 4 was developed on an analytical scale to be used for the preparation of a I-125-labeled radioactive glucuronide 5. (C) 1999 Elsevier Science Ltd. All rights reserved.
• Phenylalanine 93 of the human UGT1A10 plays a major role in the interactions of the enzyme with estrogens
  作者：Camilla Höglund、Nina Sneitz、Anna Radominska-Pandya、Liisa Laakonen、Moshe Finel

  DOI：10.1016/j.steroids.2011.07.017

  日期：2011.12

  Little is currently known about the substrate binding site of the human UDP-glucuronosyltransferases (UGTs) and the structural elements that affect their complex substrate selectivity. In order to further understand and extend our earlier findings with phenylalanines 90 and 93 of UGT1A10, we have replaced each of them with Gly, Ala, Val, Leu, Ile or Tyr, and tested the activity of the resulting 12 mutants toward eight different substrates. Apart from scopoletin glucuronidation, the F90 mutants other than F90L were nearly inactive, while the F93 mutants' activity was strongly substrate dependent. Hence, F93L displayed high entacapone and 1-naphthol glucuronidation rates, whereas F93G, which was nearly inactive in entacapone glucuronidation, was highly active toward estradiol, estriol and even ethinylestradiol, a synthetic estrogen that is a poor substrate for the wild-type UGT1A10. Kinetic analyses of 4-nitrophenol, estradiol and ethinylestradiol glucuronidation by the mutants that catalyzed the respective reactions at considerable rates, revealed increased K-m, values for 4-nitrophenol and estradiol in all the mutants, whilst the K-m values of F93G and F93A for ethinylestradiol were lower than in control UGT1A10. Based on the activity results and a new molecular model of UGT1A10, it is suggested that both F90 and F93 are located in a surface helix at the far end of the substrate binding site. Nevertheless, only F93 directly affects the selectivity of UCT1A10 toward large and rigid estrogens, particularly those with substitutions at the D ring. The effects of F93 mutations on the glucuronidation of smaller or less rigid substrates are indirect, however. (C) 2011 Elsevier Inc. All rights reserved.