Photostable and Orthogonal Solvatochromic Fluorophores for Simultaneous <i>In Situ</i> Quantification of Multiple Cellular Signaling Molecules
作者:Ashutosh Sharma、Jiachen Sun、Indira Singaram、Arthur Ralko、Daesung Lee、Wonhwa Cho
DOI:10.1021/acschembio.0c00241
日期:2020.7.17
fluorescence sensors are powerful tools for direct quantification of diverse biological analytes. To overcome a shortage of solvatochromic fluorophores crucial for in situ ratiometric imaging of biological targets, we prepared and characterized a small library of modular fluorophores with diverse spectral properties. Among them, WCB and WCR showed excellent spectral properties, including high photostability
比率荧光传感器是直接定量分析各种生物分析物的强大工具。为了克服对于生物靶标原位成比例成像至关重要的溶剂变色荧光团的不足,我们制备并表征了一个小型的具有各种光谱特性的模块化荧光团库。其中,WCB和WCR具有出色的光谱特性,包括高光稳定性,亮度和溶剂致变色性,并且由于它们的光谱正交性而非常适合于双比例成像。通过将WCB和WCR与基于蛋白质的脂质传感器结合,我们能够实现强大的原位同步活细胞中两种代谢相关的信号传导脂质磷脂酰肌醇-4,5-双磷酸和磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸的定量成像。这项研究表明,信号分子的任何组合都可以通过时空分辨的方式通过比例成像和精细调整的溶剂化变色荧光团同时进行定量。