阐明
寡糖对糖蛋白特性(例如局部构象变化,稳定性和动力学)的影响仍然具有挑战性。本文提出了一种新的部分15 N标记方法,用于合成糖蛋白的酰胺主链。使用固相肽合成(
SPPS)和天然
化学连接(NCL),在蛋白质主链的特定位置插入了13个15 N标记的
氨基酸,同时有意地改变了15 N原子的富集度。根据1 H- 15的强度,这种想法甚至可以区分相同类型的
氨基酸N HSQC信号与经典的同核TOCSY和NOESY方法相结合,因此可以理解合成的同质糖蛋白的局部构象动态。结果表明,双天线复合型或高
甘露糖型
寡糖的附着均不会干扰蛋白质构象。然而,T 1值表明
寡糖影响局部构象的动力学。温变圆二色性(CD)光谱和T 1值清楚地表明,
寡糖似乎抑制了蛋白质的波动,或者换句话说,稳定了蛋白质的结构。对
寡糖行为的这种了解表明,它对糖蛋白与其受体之间的结合亲和力有进一步的影响。