Time-Resolved Long-Lived Luminescence Imaging Method Employing Luminescent Lanthanide Probes with a New Microscopy System
作者:Kenjiro Hanaoka、Kazuya Kikuchi、Shigeru Kobayashi、Tetsuo Nagano
DOI:10.1021/ja073392j
日期:2007.11.1
luminescence to be selectively imaged. Usual time-resolved fluorescence microscopy provides fluorescence images with nanosecond resolution and has been used to image interactions between proteins, protein phosphorylation, the local pH, the refractive index, ion or oxygen concentrations, etc. Luminescent lanthanide complexes (especially europium and terbium trivalent ions (Eu3+ and Tb3+)), in contrast
对生物现象的详细研究需要卓越的荧光成像方法,一种允许精确分析的方法是时间分辨荧光测量,它提供高信噪比。在此,我们描述了一种新的荧光成像系统,通过时间分辨、长寿命发光显微镜 (TRLLM) 来可视化活生物样品中的生物分子。在 TRLLM 中,短寿命的背景荧光和散射光被门控,从而可以选择性地对长寿命的发光进行成像。通常的时间分辨荧光显微镜提供具有纳秒分辨率的荧光图像,并已用于对蛋白质、蛋白质磷酸化、局部 pH 值、折射率、离子或氧浓度等之间的相互作用进行成像。相比之下,发光镧系元素配合物(尤其是铕和铽三价离子(Eu3+ 和 Tb3+))具有毫秒级的长发光寿命。我们设计并合成了用于 TRLLM 的新型发光 Eu3+ 配合物,并开发了一种新的 TRLLM 系统,该系统使用传统的荧光显微镜,带有用于门控信号采集的图像增强器单元和氙气闪光灯作为激发源。当新开发的发光Eu3+配合物应用于活细胞时,TRL