摘要:
筛选大量类药物小分子的工作传统上是一个耗时且资源密集的任务。在我们的实验室中开发的新方法提供了一种经济划算的3D微阵列辅助筛选平台,可以快速检测成千上万的化合物。作为原理验证,该平台被用来筛选多种群体感应类似物。群体感应是细菌用来启动和传播感染的机制;在这个背景下,调节它可能具有重要的临床价值。3D微阵列载片使用了来自土壤腐生菌Erwinia carotovora subsp. carotovora的LuxR同源物CarR的荧光标记配体结合结构域进行探测。该3D微阵列平台用于发现生物活性的氯吡啶药效团,并通过荧光配体结合测定和等温量热法(ITC)进行了验证。含有氯吡啶药效团的类似物被发现能够有效抑制Serratia(IC50 ≈ 5 μM)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)(IC50 = 10–20 μM)中N-酰基同源肉桂酸内酯(AHL)介导的群体感应表型。