磷酸酶(碱性)来源于大肠杆菌 | 9001-78-9

• 物质功能分类: 有机原料 - 无机酸酯
• 分子结构分类: 有机化合物 - 有机酸及其衍生物 - 羧酸及其衍生物
• 中文名称: 磷酸酶(碱性)来源于大肠杆菌
• 中文别名: 碱性磷酸酯酶
• 英文名称: Alkaline phosphatase
• 英文别名: 2-[[1-[2-[[1-(2-aminopropanoyl)pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid
• CAS: 9001-78-9
• 化学式: C₂₁H₃₆N₈O₆
• 分子量: 496.6
• InChiKey: ITZMJCSORYKOSI-UHFFFAOYSA-N

物化性质

• 密度：
  1.12 g/mL at 20 °C
• 稳定性/保质期：
  1. 稳定性：悬浮液在4℃下可保存6个月，活性保持不变；而冻干粉在-0℃的氯化钙真空干燥器中保存一年后，活力会损失40%。

计算性质

• 辛醇/水分配系数(LogP)：
  -5
• 重原子数：
  35
• 可旋转键数：
  11
• 环数：
  2.0
• sp3杂化的碳原子比例：
  0.71
• 拓扑面积：
  227
• 氢给体数：
  6
• 氢受体数：
  8

安全信息

• TSCA：
  Yes
• 危险品标志：
  B,Xi
• 安全说明：
  S22,S23,S24/25,S26,S36
• 危险类别码：
  R36/37/38
• WGK Germany：
  3
• 海关编码：
  35079090

制备方法与用途

碱性磷酸酶简介

碱性磷酸酶（英语：Alkaline phosphatase，简称ALP或ALKP）(EC 3.1.3.1)是一类水解酶，在碱性环境下最为有效，能够从核苷酸、蛋白质、生物碱等分子上去除磷酸基团，进行去磷酸化作用。

作用

作为成骨细胞的一种外酶，碱性磷酸酶的表达活性是成骨细胞分化的一个明显特征。其主要生理功能是在成骨过程中水解磷酸酯，为羟基磷灰石的沉积提供必要的磷酸，并通过水解焦磷酸盐解除其对骨盐形成的抑制作用，有利于成骨过程。

用途

碱性磷酸酶对醇、胺、焦磷酸盐和酚的磷酸酯具有广泛的特异性，需要锌和镁或钙二价离子来维持活性。它可以用于使酪蛋白和其他蛋白质去磷酸化；也可用于使DNA或RNA的5'-末端去磷酸化以防止自身连接。在用其去磷酸化后，DNA或RNA也可以用放射性标记的磷酸盐（通过T4多核苷酸激酶）进行标记。它还常用于与抗体和其他蛋白质缀合，应用于ELISA、Western印迹和组织化学检测；当需要高灵敏度时，可用于蛋白质标记。

生理特性

碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶，即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基。该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。作为磷酸酶的一种，其作用与激酶的作用正相反，激酶是磷酸化酶，可以利用能量分子如ATP将磷酸基团加到相应底物分子上。

碱性磷酸酶在碱性环境中具有最大活力，来源于细菌的ALP最适pH为8.0，而牛源ALP则为8.5。

化学性质

碱性磷酸酶以白色冻干粉或3.2mol/L硫酸铵悬浮液的形式存在，易溶于水和稀缓冲液，pI值为5.7。最适pH值在8.0-10.5之间（视底物而定）。悬浮液于4℃保存6个月活性不变；冻干粉在氯化钙真空干燥器中于0℃保存一年，活力损失约40%。

抑制剂包括二价金属离子螯合剂（EDTA、草酸盐、半胱氨酸、组氨酸、柠檬酸）、一乙醇胺、无机磷、Be²⁺、芳香族氨基酸、尿素、碘乙酰胺和L-高精氨酸，以及Zn²⁺的高浓度。激活剂包括Tris缓冲液、低浓度的Zn²⁺、氨基醇（2-氨基-2-甲基-1-丙醇、二乙醇胺）及Mg²⁺、Co²⁺、Mn2+。1%水溶液在278nm处的吸光系数为7.6。

酶反应：4-硝基苯磷酸盐 + H2O → 4-硝基苯酚 + 无机磷。

用途

碱性磷酸酯酶适用于生化研究，并常用于酶免疫测定技术的标记，医学上常用作诊断酶。

生产方法

以小牛小肠黏膜为原料，经匀浆、过滤后酸沉淀，再用正丁醇抽提、乙醚和丙酮沉淀，最后经过活性炭处理精制而得碱性磷酸酶。