摘要:
从大冷杉(Abies grandis)中分离和测序了编码E-α-芬烯合酶、δ-塞林烯合酶和γ-葎草烯合酶的cDNA,并确定了相应的氨基酸序列。因此,提供了编码大冷杉(Abies grandis)中的E-α-芬烯合酶(SEQ ID No:13)、δ-塞林烯合酶(SEQ ID No:20)和γ-葎草烯合酶(SEQ ID No:24)表达的分离DNA序列(SEQ ID No:12、SEQ ID No:19和SEQ ID No:23)。在其他方面,提供了可复制的重组克隆载体,其编码E-α-芬烯合酶、δ-塞林烯合酶和γ-葎草烯合酶,或编码与E-α-芬烯合酶、δ-塞林烯合酶或γ-葎草烯合酶DNA或RNA的至少一部分足够互补的碱基序列,以使其能够与之杂交。在其他方面,提供了经过改造的宿主细胞,这些细胞已被转化、转染、感染和/或注射了重组克隆载体和/或编码E-α-芬烯合酶、δ-塞林烯合酶或γ-葎草烯合酶的DNA序列。因此,提供了用于重组表达上述重组倍半萜合成物的系统和方法,可用于促进它们的大量生产、分离和纯化。重组E-α-芬烯合酶、δ-塞林烯合酶和γ-葎草烯合酶可用于在植物中获得E-α-芬烯合酶、δ-塞林烯合酶和γ-葎草烯合酶的表达或增强表达,以增强倍半萜类化合物的产生,或者可用于调节或表达E-α-芬烯合酶、δ-塞林烯合酶和γ-葎草烯合酶,或其产物的生产。