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L-lactate dehydrogenase | 9001-60-9

中文名称
——
中文别名
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英文名称
L-lactate dehydrogenase
英文别名
lactic acid dehydrogenase;L(+)-nLDH;L-(+)-lactate dehydrogenase;L-lactic dehydrogenase;L-lactic acid dehydrogenase;lactate dehydrogenase;lactate dehydrogenase NAD+-dependent;lactic dehydrogenase;NAD+-lactate dehydrogenase
CAS
9001-60-9
化学式
mdl
——
分子量
——
InChiKey
——
BEILSTEIN
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EINECS
——
  • 物化性质
  • 计算性质
  • ADMET
  • 安全信息
  • SDS
  • 制备方法与用途
  • 上下游信息
  • 反应信息
  • 文献信息
  • 表征谱图
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  • 相关功能分类
  • 相关结构分类

安全信息

  • 安全说明:
    S22,S24/25,S26,S36/37
  • 危险类别码:
    R21/22,R36/37/38
  • WGK Germany:
    3
  • 海关编码:
    35079090

制备方法与用途

概述

L-乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶,广泛存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。它能催化丙酮酸生成乳酸,在动物或微生物体中,利用NADH作为辅酶,将丙酮酸通过生化反应转化为乳酸,因此在乳酸菌发酵过程中扮演关键角色。

制备方法

于1mL离心管中加入300μL菌悬液(含30mg湿菌体)和250μL磷酸钠缓冲液(pH 7.0),37℃保温5分钟,再依次添加50μL葡萄糖(终浓度为50mmol/L)和400μL苯丙酮酸(终浓度10mmol/L)。反应维持1小时后,取200μL反应液加入800μL甲醇终止反应,并通过0.22μm有机滤膜进行HPLC分析。另取200μL反应液,用1mL乙酸乙酯萃取,上层有机相经无硫酸干燥后再次过0.22μm有机滤膜,用于对映选择性分析。

结果显示,当体系反应40分钟后,L-PLA的浓度为5.62mmol/L,产率为56.2%,ee值大于99%;在反应进行80分钟时,苯丙酮酸完全被消耗,生成了8.59mmol/L的L-乳酸脱氢酶,产率达到了85.9%,ee值同样大于99%。

化学性质

L-乳酸脱氢酶以类白色冻干粉或3.2mol/L硫酸结晶悬浮液形式存在,易溶于,其pI为4.6,最适pH值为6.0。结晶酶溶液在6至8周内活性保持不变,而硫酸盐悬浮液可稳定一年以上,极稀溶液不稳定。最适宜的温度为39℃,高于60℃时会迅速失活。抑制剂包括过量的丙酮酸NAD草酸、草酰胺、羟基丙二酸丙二酸尿素、Cu²⁺、Hg²⁺、Ag⁺、4-苯甲酸焦磷酸或碱性条件下从辅酶I(NAD)形成的非竞争性抑制剂,以及过量的乳酸和还原辅酶I(NADH)形成的非竞争性抑制剂。激活剂包括2-氨基-2-甲基-1-丙醇化物、二乙醇胺肝素。酶反应方程式为:丙酮酸盐+还原辅酶I+H⁺→乳酸盐+辅酶I。

用途

L-乳酸脱氢酶广泛应用于生化研究,可用于检测丙酮酸,并对白血病及心肌梗死的诊断具有重要价值。常用作心肌梗死及白血病的诊断工具,用于鉴定丙酮酸含量。

生产方法

以猪心为原料,经磷酸钙凝胶处理、硫酸分级沉淀后,再通过透析和硫酸结晶得到产品。另一种生产方法同样使用猪心作为原料,经过相同的处理步骤制备最终的产品。

反应信息

  • 作为试剂:
    描述:
    4-溴苯乙酮 在 glucose dehydrogenase 、 D-丙氨酸 、 transaminase ATA-117 、 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 、 sodium hydroxide 、 L-lactate dehydrogenase 作用下, 反应 5.0h, 生成 (R)-(+)-1-(4-溴苯基)乙胺
    参考文献:
    名称:
    A fast and sensitive assay for measuring the activity and enantioselectivity of transaminases
    摘要:
    一种快速且灵敏的筛选方法,利用D-和L-氨基酸氧化酶来评估转氨酶活性和对映选择性,使得新型胺底物能够被迅速识别。
    DOI:
    10.1039/c0cc02919j
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