抗生素耐药性的出现促使科学家们寻找新的抗生素。转糖基酶 (TGase) 是新抗生素发现的一个有吸引力的目标,因为它位于细菌的外膜上,并且在肽聚糖合成中起重要作用。虽然在过去的三十年里已经有一些分子被确定为 TGase
抑制剂,但它们都没有被开发成人类的抗生素。发展缓慢可能是由于缺乏可用于该酶的连续、定量和高通量检测。在此,我们报告了一种基于 Förster 共振能量转移的新连续荧光测定,使用脂质 II 类似物,在脂质链中具有
二甲氨基-
偶氮苯磺酰基猝灭剂,在肽链中使用
香豆素荧光团。在转糖基化过程中,释放出带有猝灭剂的聚
异戊二烯醇,可检测
香豆素的荧光。使用该系统,研究了具有不同数量和构型的
异戊二烯单元的脂质 II 类似物的底物特异性和亲和力。此外,还测定了莫诺霉素和两种先前鉴定的小分子的抑制常数。此外,还使用新方法进行了高通量筛选,以从 120,000 个化合物库中鉴定出有效的 TGase
抑制剂。这种新的连续荧光检测不仅为研究