New Continuous Fluorometric Assay for Bacterial Transglycosylase Using Förster Resonance Energy Transfer
作者:Shih-Hsien Huang、Wei-Shen Wu、Lin-Ya Huang、Wen-Feng Huang、Wei-Chen Fu、Po-Ting Chen、Jim-Min Fang、Wei-Chieh Cheng、Ting-Jen R. Cheng、Chi-Huey Wong
DOI:10.1021/ja407985m
日期:2013.11.13
resonance energy transfer, using lipid II analogues with a dimethylamino-azobenzenesulfonyl quencher in the lipid chain and a coumarin fluorophore in the peptide chain. During the process of transglycosylation, the quencher-appended polyprenol is released and the fluorescence of coumarin can be detected. Using this system, the substrate specificity and affinity of lipid II analogues bearing various numbers
抗生素耐药性的出现促使科学家们寻找新的抗生素。转糖基酶 (TGase) 是新抗生素发现的一个有吸引力的目标,因为它位于细菌的外膜上,并且在肽聚糖合成中起重要作用。虽然在过去的三十年里已经有一些分子被确定为 TGase 抑制剂,但它们都没有被开发成人类的抗生素。发展缓慢可能是由于缺乏可用于该酶的连续、定量和高通量检测。在此,我们报告了一种基于 Förster 共振能量转移的新连续荧光测定,使用脂质 II 类似物,在脂质链中具有二甲氨基-偶氮苯磺酰基猝灭剂,在肽链中使用香豆素荧光团。在转糖基化过程中,释放出带有猝灭剂的聚异戊二烯醇,可检测香豆素的荧光。使用该系统,研究了具有不同数量和构型的异戊二烯单元的脂质 II 类似物的底物特异性和亲和力。此外,还测定了莫诺霉素和两种先前鉴定的小分子的抑制常数。此外,还使用新方法进行了高通量筛选,以从 120,000 个化合物库中鉴定出有效的 TGase 抑制剂。这种新的连续荧光检测不仅为研究
GLYCATED PROTEINS ASSAY
申请人:Edwards, Raymond
公开号:EP0772779A1
公开(公告)日:1997-05-14
EP1585971A4
申请人:——
公开号:EP1585971A4
公开(公告)日:2006-06-07
a-AMYLASE ASSAY AND USES THEREOF
申请人:VICAM, L.P.
公开号:EP1585971A2
公开(公告)日:2005-10-19
Alpha-amylase assay and uses thereof
申请人:——
公开号:US20040043116A1
公开(公告)日:2004-03-04
This invention relates to methods and kits for measuring &agr;-amylase activity in grain and plant products such as flour or stock.