Practical Synthesis of Quinoline-Protected Morpholino Oligomers for Light-Triggered Regulation of Gene Function
作者:Davide Deodato、Timothy M. Dore
DOI:10.3390/molecules25092078
日期:——
glutamic acid decarboxylase genes, gad1 and gad2. HPLC analysis confirms that the caging strategy successfully inhibits the DNA binding ability, and the activity can be restored by brief illumination with 405-nm light. Overall, the straightforward preparation together with the clean and fast photochemistry make these caged antisense reagents excellent tools to modulate gene function in-vivo with spatial
可光活化的环状笼状吗啉代寡聚体 (ccMO) 是一种有前途的工具,可以通过时空控制选择性地调节基因表达。然而,与这些试剂的制备相关的一些挑战限制了它们在生物环境中的更广泛应用。我们描述了一种新颖的 ccMO 设计,它克服了许多挑战并大大加快了合成准备。关键因素是在光可裂解接头上引入乙炔基功能,以促进使用 Huisgen 1,3-偶极环加成与寡核苷酸进行偶联反应。与之前的策略相比,这种修改减少了合成步骤的数量,并显着提高了接头的总产量和稳定性。我们使用炔基功能化的接头制备了两种不同的 ccMO,靶向谷氨酸脱羧酶基因的 mRNA,gad1 和 gad2。HPLC 分析证实,笼养策略成功地抑制了 DNA 结合能力,通过 405 nm 光的短暂照射可以恢复活性。总体而言,简单的制备以及干净快速的光化学使这些笼状反义试剂成为以空间和时间精度在体内调节基因功能的优秀工具。