作者:Emily A. Smith、William D. Thomas、Laura L. Kiessling、Robert M. Corn
DOI:10.1021/ja034165u
日期:2003.5.1
The binding of the carbohydrate-binding proteins concanavalin A (ConA) and jacalin to arrays composed of the monosaccharides mannose and galactose was monitored with SPR imaging. SPR imaging measurements were employed to accomplish the following: (i) construct adsorption isotherms for the interactions of ConA and jacalin to the carbohydrate surfaces, (ii) monitor protein binding to surfaces presenting
在金膜上制造的碳水化合物阵列用于研究碳水化合物-蛋白质与表面等离子体共振 (SPR) 成像的相互作用。由形成表面二硫键组成的固定化方案用于将硫醇修饰的碳水化合物连接到金膜上并制造碳水化合物阵列。使用偏振调制傅里叶变换红外反射吸收光谱表征碳水化合物附着步骤;和聚(二甲基硅氧烷)微通道用于将探针化合物固定在金膜上的离散位置。用 SPR 成像监测碳水化合物结合蛋白伴刀豆球蛋白 A (ConA) 和 jacalin 与由单糖甘露糖和半乳糖组成的阵列的结合。SPR 成像测量用于完成以下任务:(i) 构建 ConA 和 jacalin 与碳水化合物表面相互作用的吸附等温线,(ii) 监测蛋白质与呈现不同固定化碳水化合物组成的表面的结合,以及 (iii) 测量 ConA 和 jacalin 对甘露糖的溶液平衡解离常数和半乳糖,分别。获得 2.2 +/- 0.8 x 10(7) M(-)(1) 和 5.6