摘要:
肽-蛋白质结合物在不同的研究领域都是有用的工具,例如,仅开发很少的应用,例如开发疫苗和药物或研究生物学机制。ñ-在该领域几乎未使用氨基甲酸酯琥珀酰亚胺(NSC)化学方法。我们显示,未保护的肽,在其序列中具有一个赖氨酸残基,可以通过与二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)反应以高收率转化成NSC衍生物。在RP-HPLC纯化,冻干或保存期间,未观察到NSC基团的水解。NSC肽可在数分钟内与用作模型蛋白的溶菌酶有效反应。为了说明该方法的实用性,该方法合成了具有生物学意义的肽-蛋白质偶联物,合成了源自酪氨酸蛋白磺基转移酶(TS)的肽底物的NSC肽,并将其与志贺毒素的受体结合性无毒B亚基连接( STxB)。免疫荧光研究表明,TS-STxB共轭物在细胞内的传递及其作为天然STxB蛋白循环到高尔基体的能力。此外,我们证明TS标签可能被存在于高尔基体中的酪氨酸蛋白磺基转移酶硫酸化。因此,NSC化学法允许快速合