申请人:KOSAK, Kenneth, M.
公开号:WO1991002040A1
公开(公告)日:1991-02-21
(EN) This invention provides a method of qualitative and quantitative nucleic acid sequence analysis using luminescent cyclodextrin (CD), labels for dideoxy-nucleotide chain terminators and oligonucleotide primers. The CD labels are nonradioactive and detected in a ''black'' background, avoiding problems of fluorescence and allowing more sensitivity. Through formation of inclusion complexes with various fluorophores, the CD labels provide the versatility of different colored labels, with potentially higher signal efficiency in aqueous solutions. The CD labels have similar structures and thereby provide simplicity of synthesis and use, with more uniform chemical/physical properties, even with different colored labels. The invention is intended for high volume nucleic sequencing employing photomultipliers or charge-coupled device cameras for detection. Through the combination of these features, this invention provides advantages of speed, sensitivity, simplicity and versatility previously unknown or suggested in the art of nucleic acid sequence analysis.(FR) Cette invention concerne un procédé d'analyse qualitative et quantitative d'une séquence d'acide nucléique en utilisant une cyclodextrine luminescente (CD), des étiquettes pour des combinaisons de chaînes dideoxy-nucléotide et des amorces d'oligonucléotide. Les étiquettes CD sont non radio-actives et sont détectées dans un fond ''noir'' évitant ainsi les problèmes de fluorescence et permettant d'obtenir plus de sensibilité. Par la formation de complexes d'inclusion avec divers fluorophores, les étiquettes CD confèrent une versatilité à différentes étiquettes colorées avec une efficacité du signal potentiellement élevée dans des solutions aqueeuses. Les étiquettes CD possèdent des structures similaires et permettent ainsi une simplicité de synthèse et d'utilisation, et par conséquent des propriétés chimiques et physiques plus uniformes, même avec des étiquettes de couleurs différentes. L'invention est destinée à une mise en séquence d'acide nucléique de grand volume en utilisant des photomultiplicateurs ou des caméras de dispositif à couplage de charge pour la détection. Par combinaison de ces éléments caractérisant l'invention, on obtient des avantages tels que vitesse, sensibilité, simplicité et polyvalence antérieurement inconnues ou suggérées dans l'art de l'analyse de séquences d'acides nucléiques.