Pro216 converted to Ala. The enzyme, called peptiligase, catalyzes exceptionally efficient peptide coupling in water with a surprisingly high synthesis over hydrolysis (S/H) ratio. The S/H ratio of the peptide ligation reaction is correlated to the length of the peptide substrate and proved to be >100 for the synthesis of a 13‐mer peptide, which corresponds to >99% conversion to the ligated peptide
我们描述了一种新型的有机共溶剂稳定且不依赖阳离子的工程化酶,用于肽偶联反应。该酶是
枯草杆菌蛋白酶B
PN'的一个稳定的,不依赖
钙的突变体的变体,催化的Ser212突变为Cys,Pro216转化为Ala,该酶称为肽酶,可在
水中催化异常有效的肽偶联,
水解产生惊人的高合成(S / H)比。肽连接反应的S / H比与肽底物的长度相关,并被证明对于合成13聚体肽而言> 100,对应于> 99%的转化为肽产物的转化率和<1 %水解副反应。此外,肽连接酶不需要特定的识别基序,从而产生了广泛适用且无痕的肽连接技术。枯草芽孢杆菌,其纯化很简单。在有机助溶剂和螯合剂或变性剂的存在下,它显示出良好的活性和稳定性,从而可以连接难溶的(疏
水的)或折叠的肽。该酶可用于多种(药物)肽的(工业)合成。此外,肽连接酶能够有效催化头尾肽的环化反应。