微生物β-半乳糖苷酶在工业上被广泛用作从乳糖生产益生元低聚半乳糖(GOS)的生物催化剂。GOS混合物在婴儿配方食品中用作有益的添加剂,以模仿人乳寡糖(hMOS)的益生元作用。GOS混合物的结构多样性明显低于hMOS。由于这种结构复杂性被认为是hMOS多种生物学功能的基础,因此拓宽GOS结构的多样性非常重要。在这项研究中,来自圆形芽孢杆菌C末端截短的β-半乳糖苷酶+1亚位点附近的残基R484(BgaD-D)进行位点饱和诱变。特别是R484S和R484H突变酶显示出显着改变的酶特异性,从而导致一种新型的GOS混合物,其结构和键合类型也发生了改变。这些突变酶产生的GOS混合物含有14种在野生型GOS混合物中不存在的结构。其中10个是全新的结构。这些突变酶产生的GOS包含(β1→3)和(β1→4)键的组合,而野生型酶对(β1→4)键具有明显的偏好。三糖β- d -Gal p-(1→3)-β- d-
Engineering of the <i>Bacillus circulans</i> β-Galactosidase Product Specificity
作者:Huifang Yin、Tjaard Pijning、Xiangfeng Meng、Lubbert Dijkhuizen、Sander S. van Leeuwen
DOI:10.1021/acs.biochem.7b00032
日期:2017.2.7
the multiple biological functions of hMOS, it is important to broaden the variety of GOS structures. In this study, residue R484 near +1 subsite of the C-terminally truncated β-galactosidase from Bacillus circulans (BgaD-D) was subjected to site saturation mutagenesis. Especially the R484S and R484H mutant enzymes displayed significantly altered enzyme specificity, leading to a new type of GOS mixture
微生物β-半乳糖苷酶在工业上被广泛用作从乳糖生产益生元低聚半乳糖(GOS)的生物催化剂。GOS混合物在婴儿配方食品中用作有益的添加剂,以模仿人乳寡糖(hMOS)的益生元作用。GOS混合物的结构多样性明显低于hMOS。由于这种结构复杂性被认为是hMOS多种生物学功能的基础,因此拓宽GOS结构的多样性非常重要。在这项研究中,来自圆形芽孢杆菌C末端截短的β-半乳糖苷酶+1亚位点附近的残基R484(BgaD-D)进行位点饱和诱变。特别是R484S和R484H突变酶显示出显着改变的酶特异性,从而导致一种新型的GOS混合物,其结构和键合类型也发生了改变。这些突变酶产生的GOS混合物含有14种在野生型GOS混合物中不存在的结构。其中10个是全新的结构。这些突变酶产生的GOS包含(β1→3)和(β1→4)键的组合,而野生型酶对(β1→4)键具有明显的偏好。三糖β- d -Gal p-(1→3)-β- d-