HA Peptide (HA tag) 是由人类流感血凝素(HA)的9个氨基酸组成的多肽,广泛用于细胞生物学和生物化学中分离、纯化、检测和追踪目标蛋白。
体外研究HA Peptide 是一个高度免疫反应性的标签,通常用于从细胞培养上清液和细胞裂解物中分离标记蛋白质,在中性pH条件下操作方便,也可通过 western blot 方式轻松检测。由于其体积小,不太可能干扰融合伴侣蛋白质的生物活性和功能。该多肽来自人类流感血凝素(HA),对应于氨基酸 98–106,并且是一个强大的免疫反应性表位,使其成为分离、纯化、检测和追踪目标蛋白的理想选择。
重组 HA 标签蛋白可以通过特异性的抗-HA 单克隆抗体与树脂共价结合进行分离。通过温和的 elution 方式(HA 肽浓度为 1 mg/mL 在 TBS 中)可从树脂中洗脱出标记蛋白质;同时,三种化学 elution 选项分别为:0.1 M 氨基乙酸 (pH 2-2.8)、3 M 十二烷基磺酸钠(NaSCN)或 50 mM 氢氧化钠(NaOH)。在哺乳动物表达载体的 N 端编码 HA Peptide 是通过 T7 前导基因驱动在大肠杆菌中高效表达的一个重要元素,即使没有转录活性的 T7 RNAP。研究结果表明,HA Peptide 可被 caspase 3/7 水解,水解后会完全丧失免疫反应性。
使用 HA 标记蛋白质和构建体来研究细胞死亡相关及凋亡机制可能会产生严重的伪影。
多肽流感病毒血凝素 (HA) 肽是来自人类流感血凝素的多肽,由9个氨基酸组成。多肽结构中含有大量的羧基和羟基等活性官能团,并广泛用于细胞生物学和生物化学中分离、纯化、检测和追踪目标蛋白。
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