摘要:
我们合成了四种光活化河豚毒素(TTX)衍生物和相应的三价化合物,并对其进行了孔化。引入的光活性基团是硝基叠氮苯基(NAP)基团和三氟甲基重氮基苯甲酰基(TDB)基团,分别作为腈和碳烯的前体,以及氟硝基苯氧基基团的两种异构体,这是一种对亲核物具有选择性的新光活性基团。这四种衍生物与钠通道的结合亲和力与 TTX 相似,但特定光诱导结合值却出乎意料地低(低至 2.5%),这表明光活性基团的方向可能不利于 TTX 结合位点的标记反应。对两种标记的钠通道蛋白进行了纯化和消化。用 TTXenNAP 标记的肽在 0.1% 三氟乙酸-乙腈高效液相色谱法中失去了大部分标记,而用 TTXenTDB 标记的肽在此过程中保留了标记。TTXenTDB标记的肽在反相C4色谱柱上被洗脱成四个主要馏分,回收率为80%。