Leupeptin hemisulfate anhydrous | 55123-66-5

• 物质功能分类: 生物化工 - 多肽
• 分子结构分类: 有机化合物 - 有机酸及其衍生物 - 羧酸及其衍生物
• 英文名称: Leupeptin hemisulfate anhydrous
• 英文别名: (2S)-2-acetamido-N-[(2S)-1-[[(2S)-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methylpentanamide;sulfuric acid
• CAS: 55123-66-5；24365-47-7；103476-89-7
• 化学式: C40H78N12O12S
• 分子量: 951.2
• InChiKey: CIPMKIHUGVGQTG-VFFZMTJFSA-N

物化性质

• 比旋光度：
  -76 º (c=1, water)
• 溶解度：
  H2O: 10 mM 溶液在 4 °C 下可稳定一周。储备液在 20°C 下可稳定长达 6 个月。

计算性质

• 辛醇/水分配系数(LogP)：
  -1.04
• 重原子数：
  65
• 可旋转键数：
  28
• 环数：
  0.0
• sp3杂化的碳原子比例：
  0.75
• 拓扑面积：
  421
• 氢给体数：
  12
• 氢受体数：
  14

安全信息

• 危险品标志：
  Xn
• 危险类别码：
  R20/21/22
• WGK Germany：
  3
• RTECS号：
  YV4205100

制备方法与用途

亮抑酶肽是一种白色或类白色的粉末，由玫瑰链霉菌Streptomyces roseus MB-26-AI产生的胰蛋白酶抑制剂。纯度较高的亮抑酶肽熔点为110～140℃，可溶于水、甲醇、乙醇、丁醇和二甲亚砜，而不溶于乙酸乙酯、丙酮、氯仿或己烷等有机溶剂。它对Rydon-Smith反应和坂口呈附哇反应有阳性反应，并且能够与茚三酮、三氯化铁、蒽酮及莫利氏试剂发生颜色变化。

IC50值

亮抑酶肽对血纤维蛋白溶酶的抑制IC50为8μg/ml，但不抑制糜蛋白酶。溶解度方面，在水中的浓度可达到50mg/ml；10mM的水溶液在4℃下稳定一周，在-20℃下稳定6个月。一般工作浓度为10-100mM。

用途

主要应用于生化研究，能抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、组织蛋酶B、血纤维蛋白溶酶及激肽释放酶等，并且与底物呈竞争性抑制。此外，它还能抑制多种丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。

生物活性

Leupeptin Hemisulfate 是一种可逆的溶酶体丝氨酸蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶抑制剂，能有效抑制cathepsin B（Ki=6 nM）、calpain（Ki=10 nM）、trypsin（Ki=35 nM）、plasmin（Ki=3.4 μM）及kallikrein（Ki=19 μM），对chymotrypsin、elastase、renin或pepsin没有抑制作用。

靶点

• Cysteine protease
• Serine protease

体外研究

Leupeptin，由不同种类的放线菌产生，强烈抑制蛋白质的水解。其盐酸半硫酸盐形式能够保护微管蛋白在分离过程中免受内源性蛋白质水解酶的破坏，并提高微管蛋白纯度。此外，Leupeptin hemisulfate还能恢复细胞悬浮培养液中高达50%的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的表达。

体内研究

在C57BL/6NCrl雄性小鼠体内实验中，使用剂量为0 mg/kg、9 mg/kg、18 mg/kg 和36 mg/kg 的Leupeptin进行腹腔注射4小时。结果显示，高剂量组显著促进了LC3b-II的累积。

实验设计

• 动物模型：C57BL/6NCrl雄性小鼠（6-8周龄，20-25 g）
• 给药量：0 mg/kg、9 mg/kg、18 mg/kg、36 mg/kg
• 给药方式：腹腔注射；持续4小时
• 结果：促进了小鼠肝脏中LC3b-II的积累

参考质量标准

外观性状：白色粉末
纯度（HPLC）：≥98.0%
醋酸根含量：≤12.0%
水分含量：≤8.0%
肽含量：≥80.0%
内毒素：≤50EU/mg
氨基酸组成分析：≤±10%