[EN] METHODS FOR ELECTROCHEMICAL DETECTION/QUANTIFICATION OF A NUCLEIC ACID<br/>[FR] procédés de détection/quantification électrochimique d'un acide nucléique
申请人:AGENCY SCIENCE TECH & RES
公开号:WO2008018833A1
公开(公告)日:2008-02-14
[EN] The invention provides methods and kits for the electrochemical detection and/or quantification of a target nucleic acid molecule by means of a detection electrode. In one method there is immobilized on the detection electrode a peptide nucleic acid (PNA) capture molecule, which has a nucleotide sequence that is at least partially complementary to at least a portion of the target nucleic acid molecule. The electrode is contacted with a solution expected to include the target nucleic acid molecule and the target nucleic acid molecule allowed to hybridize to the PNA, thereby allowing the formation of a complex between the PNA capture molecule and the target nucleic acid molecule. A polymerisable positively chargeable precursor is added, which associates to the complex formed between the PNA capture molecule and the target nucleic acid molecule. A suitable reactant molecule is added, initiating the polymerisation of the polymerisable positively chargeable precursor and the formation of an electroconductive polymer. An electrochemical measurement at the detection electrode is performed. In another method a nucleic acid capture molecule is immobilized on the electrode. In this method a polymerisable positively chargeable precursor, a suitable substrate molecule, and an enzyme attached to a detection probe nucleic acid molecule are used. The detection probe nucleic acid molecule is at least partially complementary to at least a portion of the target nucleic acid molecule. The detection probe hybridizes to a portion of the target nucleic acid that is different from the portion to which the capture nucleic acid molecule hybridises.
[FR] L'invention concerne des procédés et des kits de détection et/ou de quantification électrochimique d'une molécule d'acide nucléique cible au moyen d'une électrode de détection. Un procédé consiste à immobiliser sur l'électrode de détection une molécule de capture d'acide nucléique de peptide (APN), ayant une séquence de nucléotides qui est au moins partiellement complémentaire d'au moins une partie de la molécule d'acide nucléique cible. L'électrode est mise au contact d'une solution devant inclure la molécule d'acide nucléique cible et on laisse la molécule d'acide nucléique cible s'hybrider avec l'APN, permettant ainsi la formation d'un complexe entre la molécule de capture APN et la molécule d'acide nucléique cible. On ajoute un précurseur chargeable positivement et polymérisable, qui se lie au complexe formé entre la molécule de capture APN et la molécule d'acide nucléique cible. On ajoute une molécule réactive adéquate, ce qui résulte en l'initiation de la polymérisation du précurseur chargeable positivement et polymérisable et la formation d'un polymère électroconducteur. On réalise une mesure électrochimique au niveau de l'électrode de détection. Dans un autre procédé on immobilise une molécule de capture d'acide nucléique sur l'électrode. Dans ce procédé, on utilise un précurseur chargeable de manière positive et polymérisable, une molécule de substrat adéquate et une enzyme fixée à une molécule d'acide nucléique de sonde de détection. La molécule d'acide nucléique de sonde de détection est au moins partiellement complémentaire d'au moins une partie de la molécule d'acide nucléique cible. La sonde de détection s'hybride à une partie de l'acide nucléique cible qui est différente de la partie à laquelle s'hybride la molécule d'acide nucléique de capture.