Thermostable Transketolase from<i>Geobacillus stearothermophilus:</i>Characterization and Catalytic Properties
作者:Juliane Abdoul-Zabar、Isabelle Sorel、Virgil Hélaine、Franck Charmantray、Titu Devamani、Dong Yi、Véronique de Berardinis、Dominique Louis、Philippe Marlière、Wolf-Dieter Fessner、Laurence Hecquet
DOI:10.1002/adsc.201200590
日期:2013.1.14
Here we have characterized the first transketolase (TK) from a thermophilic microorganism, Geobacillus stearothermophilus, which was expressed from a synthetic gene in Escherichia coli. The G. stearothermophilus TK (mTKgst) retained 100% activity for one week at 50 °C and for 3 days at 65 °C, and has an optimum temperature range around 60–70 °C, which will be useful for preparative applications and
在这里,我们表征了嗜热微生物嗜热脂肪地芽孢杆菌的第一个转酮酶(TK),该酶是由大肠杆菌中的合成基因表达的。在G.嗜热脂肪TK(MTK GST)保持100%活性一周,在50℃,并在65℃下3天,并且具有最佳温度范围约60-70℃,这将是制备应用和有用用于未来的生物催化剂开发。mTK gst的热稳定性使我们能够通过在65°C的温度下对粗细胞提取物进行热激处理45分钟,轻松地进行一步纯化,从而从1 L培养物中直接产生132 mg的纯mTK gst。mTK的反应速率GST与乙醇醛高出14倍,在70℃比在20℃下,和高4倍,在50℃时相比,大肠杆菌相同的条件下TK。当在50°C下用其他醛作为受体进行测试时,mTK gst活性比在20°C下获得的mTK gst活性高约3倍。这项新的传统知识在生物催化中的应用是以羟基丙酮酸为供体,三种醛为受体,分别是乙醇醛,D-甘油醛和丁醛,其中相应的产物L-赤藓糖1,D-木酮糖2和1