已知植物 O-甲基转移酶 (O
MT) 参与植物次生代谢物的甲基化,尤其是苯
丙烷和类
黄酮化合物。使用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 从
水稻中克隆并表征了 O
MT,RO
MT-9。RO
MT-9 的爆炸结果显示与来自玉米和普通小麦的
咖啡酸 O
MT 具有 73% 的同一性。RO
MT-9 在大肠杆菌中表达,其
重组蛋白使用亲和层析纯化。然后测试其将 S-
腺苷-l-甲
硫氨酸的甲基转移到类
黄酮底物、
圣草酚、
木犀草素、
槲皮素和
紫杉叶素的能力,所有这些都具有 3'-羟基官能团。使用TLC、HPLC、HPLC/MS和NMR光谱分析反应产物。核磁共振分析表明,RO
MT-9 将甲基特异性转移到
槲皮素的 3'-羟基上,从而形成其甲氧基衍
生物。此外,RO
MT-9 将含有 3'-羟基官能团的
黄酮类化合物如
圣草酚、
木犀草素、
槲皮素和
紫杉叶素转化为相应的甲氧基衍
生物,表明 RO
MT-9 是一种对
黄酮类化合物的 3'-羟基具有严格特异性的