Trehalose Glycopolymers for Stabilization of Protein Conjugates to Environmental Stressors
作者:Rock J. Mancini、Juneyoung Lee、Heather D. Maynard
DOI:10.1021/ja2120234
日期:2012.5.23
times with lyophilization and 81% activity when the protein was heated at 90 °C for 1 h; this is in contrast to 16% and 18% retention of activity, respectively, for the wild-type protein alone. The glycopolymers were compared to equivalent concentrations of trehalose and poly(ethylene glycol) (PEG) and found to be superior at stabilizing the protein to lyophilization and heat. In addition, the protein-glycopolymer
在此,我们报告了海藻糖侧链聚合物的合成,用于稳定蛋白质缀合物对环境压力的影响。糖单体 4,6-O-(4-乙烯基亚苄基)-α,α-海藻糖分两步以 40% 的产率合成,无需使用保护基化学。含有海藻糖侧基的聚合物是通过可逆加成-断裂链转移 (RAFT) 聚合反应制备的,使用两种不同的硫醇反应性链转移剂 (CTA),随后通过二硫键与蛋白质结合。得到的糖聚合物是明确定义的,并且获得了从 4200 到 49 500 Da 的分子量范围。聚合物与硫醇化的鸡蛋清溶菌酶结合并纯化。相对于野生型蛋白质,当添加或共价连接到蛋白质时,糖聚合物显着增加了对冻干和热的稳定性。当溶菌酶冷冻干燥 10 次时,活性保持率高达 100%,当蛋白质在 90 °C 下加热 1 小时时,活性保持率为 81%;这与单独使用野生型蛋白质分别保留 16% 和 18% 的活性形成对比。将糖聚合物与等效浓度的海藻糖和聚(乙二醇)(PEG)进