Design of a Hybrid Biosensor for Enhanced Phosphopeptide Recognition Based on a Phosphoprotein Binding Domain Coupled with a Fluorescent Chemosensor
作者:Takahiro Anai、Eiji Nakata、Yoichiro Koshi、Akio Ojida、Itaru Hamachi
DOI:10.1021/ja0693284
日期:2007.5.1
biosensors with sufficient sensing specificity are useful analytical tools for detection of biologically important substances in complicated biological systems. Here, we present the design of a hybrid biosensor, specific for a bis-phosphorylated peptide, based on a natural phosphoprotein binding domain coupled with an artificial fluorescent chemosensor. The hybrid biosensor consists of a phosphoprotein binding
具有足够传感特异性的基于蛋白质的荧光生物传感器是检测复杂生物系统中重要生物物质的有用分析工具。在这里,我们基于天然磷蛋白结合域与人工荧光化学传感器设计了一种混合生物传感器,专用于双磷酸化肽。混合生物传感器由磷蛋白结合域组成,即 WW 域,其中引入了具有 Zn(II)-二吡啶甲胺 (Dpa) 作为磷酸结合基序的荧光 stilbazole。在各种磷酸盐物质(如单磷酸化肽、ATP 等)存在的情况下,它对特定的双磷酸化肽表现出很强的结合亲和力和高传感选择性。详细的荧光滴定实验清楚地表明,结合诱导的荧光增强和传感选择性是通过混合生物传感器的两个结合位点,即 WW 结构域和 Zn(II)-Dpa 化学传感器单元的协同作用实现的。因此,很明显,拴系的 Zn(II)-Dpa-stilbazole 单元不仅作为荧光信号传感器,而且作为混合生物传感器中的亚结合位点。利用其选择性传感特性,混合生物传感器成功应用