Comparison of the expression of calcitonin receptor-like receptor (CRLR) and receptor activity modifying proteins (RAMPs) with CGRP and adrenomedullin binding in cell lines
摘要:
降钙素基因相关肽(CGRP)和/或肾上腺髓质素的受体由降钙素受体样受体(CRLR)及其特异性受体活动修饰蛋白(RAMPs)形成。
目前关于CRLR/RAMP复合物能否形成内源性CGRP和肾上腺髓质素受体的证据较少。因此,我们研究了已知表达这些受体的实验细胞株中,CGRP和/或肾上腺髓质素的结合是否与CRLR和RAMPmRNA的表达相关。同时,我们还使用了特异性的人类或大鼠CRLR抗体来检测这些细胞中是否存在CRLR。
我们证实了CGRP亚型1受体(CGRP1)在SK-N-MC神经母细胞瘤细胞中的药理学活性。L6肌母细胞同时表达CGRP1和肾上腺髓质素受体,而Rat-2成纤维细胞仅表达肾上腺髓质素受体。相反,Col-29结肠上皮细胞中未能证实CGRP2受体的药理学活性,而在本研究中这些细胞表现出类似CGRP1的特征。
L6、SK-N-MC和Col-29细胞表达RAMP1和RAMP2mRNA,Rat-2成纤维细胞仅表达RAMP2mRNA。所有细胞株中均未检测到可检测水平的RAMP3mRNA。
SK-N-MC、Col-29和Rat-2成纤维细胞中表达了CRLRmRNA。然而,通过Northern blot分析,一种来源的L6细胞中未检出CRLRmRNA。相反,另一种来源的L6细胞中检测到了CRLRmRNA。所有细胞株均表达了CRLR蛋白。因此,即使在Northern blot分析中未检测到CRLRmRNA,也不能排除该受体的存在。
这些数据有力支持了CRLR与适当的RAMPs共同作为CGRP和肾上腺髓质素的结合位点存在于培养的细胞中。
British Journal of Pharmacology (2002) 136, 784–792; doi:10.1038/sj.bjp.0704761