(EN) A chemiluminescent assay method, compositions, kits and chemiluminescent acridan compounds are described which use a two-step chemiluminescent reaction process. The reaction involves an acridan compound, preferably a derivative of an N-alkylacridan-9-carboxylic acid, which undergoes a reaction with a peroxide compound, a peroxidase enzyme and an enhancer under conditions of time, temperature and pH which permit the accumulation of an intermediate compound, which is subsequently induced to produce a burst of light by raising the pH. The result is generation of very high intensity light from the reaction. The peroxidase enzyme is present alone or linked to a member of a specific binding pair in an immunoassay, DNA probe assay or other assay where the hydrolytic enzyme is bound to a reporter molecule. The method is particularly amenable to automated assay because of the separation of the incubation and light generating steps.(FR) L'invention concerne des compositions chimioluminescentes d'acridane, des procédés d'utilisation de ces compositions et des kits utiles pour des réactions chimioluminescentes en deux étapes. La réaction fait appel à un composé acridane, de préférence un dérivé de l'acide N-alkylacridane-9-carboxylique, qui subit une réaction avec un composé peroxyde, une enzyme peroxydase et un promoteur, dans des conditions de temps, de température et de pH qui permettent une accumulation d'un composé intermédiaire, chez lequel on induit ensuite un éclair de lumière en augmentant le pH. Le résultat de la réaction est la génération d'une lumière à haute intensité. L'enzyme peroxydase est présente seule ou liée à un élément d'une paire spécifique dans un essai immunologique, dans des essais avec des sondes d'ADN ou d'autres essais où l'enzyme hydrolytique et liée à une molécule reporteur. Ce procédé est particulièrement utile pour des essais automatiques, à cause de la séparation des étapes d'incubation et de génération de lumière.
这一
化学发光反应测定方法及其应用涉及用于
化学发光反应测定的复合物、试剂盒和acridan类
化学发光化合物。这些方法基于一种两步
化学发光反应过程。该反应采用一种acridan类化合物,最好是N-烷基acridan-9-
羧酸的衍
生物,与过氧酶、
促进剂等在适宜的时间、温度和pH条件下反应,使中间产物积累,并由此产生强烈的发光。由此得到了该反应所用的光强度很高的光束。在免疫测定法、DNA探针测定法或其他需要酶与标记物结合的测定方法中,过氧酶被单独使用或与特异性配对中的成员结合使用。由于该测定方法进行了反应前保温和光激发两个分离步骤,因此它特别适合自动化测定。