[EN] ALLOSTERIC ENZYME COUPLED IMMUNOASSAY (AECIA)<br/>[FR] DOSAGE IMMUNOLOGIQUE COUPLE A UNE ENZYME ALLOSTERIQUE
申请人:GEN ATOMICS
公开号:WO2006065967A2
公开(公告)日:2006-06-22
[EN] The present invention is directed to methods and compositions for an allosteric enzyme coupled assay, and preferably to an allosteric enzyme coupled immunoassay (AECIA). The assay uses an allosteric enzyme to generate a readout signal. The assay is based on the competition between an analyte in a sample and an analyte or analyte analog conjugated to an allosteric regulator with a specific binding reagent for the analyte. In the absence of any analyte in the sample, an analyte or an analyte analog conjugated to an allosteric regulator binds to the specific binding reagent and such binding prevents or reduces the allosteric regulator's regulation, e.g., activation, on the allosteric enzyme. An analyte, if present in the sample, competes with the analyte or analyte analog conjugated to the allosteric regulator for binding with the specific binding reagent, reduces or prevents binding of the specific binding reagent to the analyte or analyte analog conjugated to the allosteric regulator, leading to increased regulation, e.g., activation, of the enzyme. 1-substituted-(3-D-fructofuranose 2, 6bisphosphate compounds and conjugates comprising the same are provided. Kits comprising the conjugates, and methods using the conjugates for assaying an analyte are further provided.
[FR] La présente invention concerne des méthodes et des compositions pour un dosage couplé à une enzyme allostérique et, de préférence, un dosage immunologique couplé à une enzyme allostérique. Dans ce dosage, une enzyme allostérique est utilisée pour produire un signal de sortie. Le dosage est fondé sur la concurrence entre un analyte contenu dans un échantillon et un analyte ou un analogue d'analyte couplé à un régulateur allostérique avec un réactif de liaison spécifique pour l'analyte. Lorsqu'il n'y a aucun analyte dans l'échantillon, un analyte ou un analogue d'analyte couplé à un régulateur allostérique se lie au réactif de liaison spécifique. Ce phénomène permet d'atténuer ou d'empêcher la régulation du régulateur, l'activation, par exemple, par rapport à l'enzyme allostérique. Lorsqu'il y a un analyte dans l'échantillon, ce dernier est en concurrence avec l'analyte ou l'analogue d'analyte coulé à un régulateur allostérique pour la liaison avec le réactif de liaison spécifique. Ce phénomène permet d'atténuer ou d'empêcher la liaison du réactif de liaison spécifique à l'analyte ou à l'analogue d'analyte couplé à un régulateur allostérique, ce qui augmente la régulation, l'activation, par exemple, de l'enzyme. L'invention concerne également des composés à base de bêta-D-fructofuranose 2,6-biphosphate 1-substitué et des conjugués contenant ceux-ci. L'invention concerne également des trousses comprenant ces conjugués, ainsi que des méthodes permettant d'utiliser les conjugués pour le dosage d'un analyte.