摘要:
从细菌性肉毒毒素(BoNT)中敏感检测高度毒性的肉毒毒素对于人类健康至关重要,因为它可能通过食物传播、伤口引入或作为医源性物质引发疾病。此外,近期它还被视为一种可能的生物战剂。在过去十年中,在BoNT检测技术方面取得了显著进展,包括小鼠致死实验、酶联免疫吸附测定、内肽酶测定和质谱分析。然而,快速检测、活性毒素检测、敏感和准确的检测等关键实验要求仍然面临挑战。在这里,我们提出了一种新方法,通过糖量化聚合酶链反应(qPCR)检测活性BoNT。与BoNT的结合域相互作用的唾液酸乳糖被结合成唾液酸乳糖-DNA杂交物,作为活性BoNT的结合探针,并通过BoNT免疫沉淀进行回收。然后,对结合的唾液酸乳糖-DNA进行糖量qPCR分析,以检测蜂蜜中低致摩尔浓度的BoNT,以及从阿托摩尔到费摩尔浓度的BoNT,这是婴儿肉毒中毒最常见的食源性来源。