摘要:
PEGA树脂是一种聚乙二醇二甲基丙烯酰胺共聚物,作为亲和支持剂用于纯化碳水化合物结合大分子,即无阳离子依赖的甘露磷酸酯受体(CI-MPR)和针对链球菌A群寡糖的多克隆抗体。使用两种聚乙二醇(PEG)衍生物作为交联剂,即二丙烯酰化PEG1900衍生物或更长的二丙烯酰化PEG4000衍生物。更长的交联剂从聚乙二醇4000经过四步合成而来。通过相反的悬浮自由基共聚反应将相应的烯丙基糖苷与丙烯酰胺和PEG交联剂交联制备含M6P的免疫亲和柱。短交联剂(PEG1900衍生物)的树脂具有6.3%的摩尔交联,而长交联剂(PEG4000衍生物)的树脂具有3.8%的摩尔交联。对于含三糖基链球菌A的免疫亲和柱,制备了三种带有自由氨基基团的PEGA亲和支持剂,并随后用作三糖基的肟酸盐加合物活化剂。其中一个树脂含有短交联剂PEG1900,摩尔交联为3%,另外两个树脂含有长交联剂PEG4000,摩尔交联分别为5%和3%。在亲和色谱研究中,含M6P的柱无法保留无阳离子依赖的甘露磷酸酯受体(CI-MPR,~215kDa),而两个三糖基链球菌A免疫亲和柱观察到抗体(~150kDa)的保留。关键词:PEGA树脂,免疫亲和支持剂,碳水化合物配体,抗体纯化。