3α-羟类固醇脱氢酶是一种由睾酮丛毛单胞菌分泌的类固醇脱氢酶,含有258个氨基酸残基,理论分子量为26.4kD。该酶可逆地催化C19-27类固醇3位羟基/酮基的氧化还原反应,作用于多种类固醇基质。其等电点为4.8,最适pH值在7-9之间。汞离子(Hg2+)、银离子(Ag+)等会抑制酶活性,而金属离子螯合剂如EDTA不会抑制酶活,并且能在一定程度上对酶的稳定和保存提供帮助。
应用3α-羟基类固醇脱氢酶为白色微黄无定形粉末。胆汁酸是其一种作用底物,在临床上通过催化羟基类固醇的脱氢反应来检测总胆汁酸含量,具有重要的临床应用价值。