摘要:
结构明确的 IgG-Fc 糖型对于理解糖基化对抗体效应子功能的影响非常需要。我们在本文中报告了一系列均质 IgG-Fc 糖型的化学酶合成和 Fcγ 受体结合。化学酶促方法包括定义的 N-聚糖恶唑啉作为供体底物的化学合成、在存在 α-甘露糖苷酶抑制剂 kifunensine 的情况下在 CHO 细胞系中表达 Fc 域,以及内切糖苷酶催化的去糖基化 Fc 的糖基化域(GlcNAc-Fc 同源二聚体)与合成聚糖恶唑啉。发现来自 Arthrobacter protophormiae (Endo-A) 的酶非常有效地吸收各种修饰的 N-聚糖核心恶唑啉,包括二等分的含糖衍生物,用于 Fc 糖基化重塑,导致形成相应的均质 Fc 糖型。然而,Endo-A 和 Mucor hiemalis 糖苷内切酶突变体(EndoM-N175A 和 EndoM-N175Q)都不能将全长复合型 N-聚糖转移到 Fc 结构域,暗示这两种酶在