shown to be adequate markers for quantitation experiments. In order to gain a better understanding of the fragmentation processes, detailed quantum chemical calculations have been performed at levels which are expected to provide good accuracy. A thorough study has been carried out with a reduced model in which only the 'active' part of the molecule is retained. This allowed obtaining full mechanistic
蛋白质聚集体是许多中枢神经系统疾病(例如polyQ扩张疾病)的特征。通过转谷
氨酰胺酶的作用形成的共价键被认为参与了这些聚集体的稳定化。转谷
氨酰胺酶催化在谷
氨酰胺基和
多肽的赖
氨酰残基的侧链之间形成交联。在神经元聚集体的最终蛋白
水解消化物中,对异肽N(ε)-(γ-谷
氨酰基)赖
氨酸(iEK)的鉴定将证明转谷
氨酰胺酶参与了神经系统疾病。为了鉴定和量化神经系统疾病患者的大脑中存在的iEK,开发了一种结合
液相色谱和多步质谱的方法。由于聚集蛋白的消化物中可能存在iEK的等压肽,因此片段诊断离子的选择至关重要。这些离子是通过在iEK上进行质谱鉴定而确定的,该iEK在羧基官能团和末端胺上进行了衍生化以提高灵敏度。
氘代分子以及(13)C(6)-和(15)N(2)-同位素异构体用于在多步裂解中衍生纤丝。已经鉴定出主要的碎片模式,因此显示出两个离子(m / z 396 [
MH-56-42 u](+)和350 [
MH-56-88