液相色谱
液相色谱是当前微量分析物质组分的重要方法之一。在色谱分析中，通常涉及两种相：固定相，具有大比表面积；流动相，携带有待分离的混合物，并通过固定相。若使用液体作为流动相，则称为液相色谱。
液相色谱又称“液相层析”，是一种色层分析方法，其流动相为液体。由于层析柱内的液体阻力较大，为了提高分析速度，通常采用高压输液方式，因此又被称为“高压液相色谱”。根据固定相的不同，可分为液-固色谱和液-液色谱；依据固定相与流动相之间的平衡类型，可进一步分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱及凝胶色谱等。它适用于有机物、无机物以及高分子液体的分离与分析。
【简史】 俄国植物学家茨维特（M.S.Tswett）在1906年首次使用柱层析技术对植物色素进行了分离，这是液相色谱法最古老的一种方法。近三十年来，各种不同的色谱分离方法发展起来，并成为分析化学的重要组成部分。
- 经典液相色谱法：流动相依靠自身重力从上往下移动，在柱下端出口处逐份收集流出液并进行其他测定；这种技术的分析速度较慢、效率较低。
- 薄层色谱法：40年代前后出现，操作方便且提高了分析速度，但重复性和定量性较差。
- 高效液相色谱法（HPLC）：60年代初，吉迪丁斯（J.C.Gidelings）修正了气相色谱理论并将其应用于液相色谱，为HPLC的现代化奠定了基础。后续技术改进包括高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器的应用，使得该方法分析速度快、分离效率高且操作自动化。1971年，亨利（R.A.Henry）等首次将HPLC用于农药分析。
【高效液相色谱法】 高效液相色谱法是现代分析化学中最重要的分离技术之一。基本原理为使用具有特定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液作为流动相，借助泵的力量将其注入装有填充剂的色谱柱内，供试品随流动相进入后在柱内进行分离，并逐个被检测器捕获并记录下其色谱图以获取测定结果。由于采用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，HPLC具有高分离性能、快分析速度的特点。
该方法适用于能在特定填充剂色谱柱上实现有效分离的各种药品的分析与检测，尤其适合多组分药品的测定以及杂质检查或大分子物质的测定。某些情况下可能需要在色谱分离前或后进行衍生化反应以实现分离或检测。常用的色谱柱填料包括硅胶（用于正相色谱）、化学键合固定相（根据键合基团的不同适用于反相或正相色谱）、离子交换填料（用于离子交换色谱）和具有特定孔径的大孔填料（适用于排阻色谱）。
高效液相色谱仪主要由泵、进样器、色谱柱、检测器及色谱数据处理系统组成。常用的检测器包括可变波长紫外/可见光检测器，此外还有示差折光检测器和蒸发光散射检测器等。色谱信息的收集与处理通常通过积分仪或数据工作站完成；梯度洗脱可通过两台泵或单泵配以比例阀进行程序控制实现。
相关化合物
| 中文名称 | 英文名称 | CAS号 | 化学式 | 结构式图片 |
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| 荧光胺 | fluorescamine | 38183-12-9 | C17H10O4 |
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| 硝基氨基吡咯烷苯并恶嗪 | (S)-(+)-4-(3-Amino-pyrrolidino)-7-nitrobenzofurazan | 143112-52-1 | C10H11N5O3 |
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| 琥珀酰亚胺基（2R）-6-（四氢-2H-吡喃-2-基氧基）-2,5,7,8-四甲基苯并-2-羧酸 | Succinimidyl (2R)-6-(Tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-carboxylate | 1069137-73-0 | C23H29NO7 |
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| 洋橄榄叶素 | azalomycin B | 37318-06-2 | C54H88O18 |
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| 二茂铁基乙酸 | ferroceneacetic acid | 1287-16-7 | C12H12FeO2 |
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| 乙二醇二甲醚 | 1,2-dimethoxyethane | 110-71-4 | C4H10O2 |
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| 丹磺酰肼 | dabsyl hydrazine | 72565-41-4 | C14H17N5O2S |
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| NBD-CO-HZ[=4-(N-肼羰甲基-N-甲氨基)-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑] | 4-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole | 221263-97-4 | C9H10N6O4 |
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| NAlpha-(5-氟-2,4-二硝基苯基)-L-亮氨酰胺 | N-(5-fluoro-2,4-dinitrophenyl)-L-leucinamide | 178065-29-7 | C12H15FN4O5 |
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| NAlpha-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-D-亮氨酰铵 | D-FDLA | 178065-30-0 | C12H15FN4O5 |
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| N-[7-(N,N-二甲胺基)-4-苯并呋吖基]二甲氨乙酰基氯化铵 | 4-(N-chloroformylmethyl-N-methyl)amino-7-N,N-dimethylaminosulphonyl-2,1,3-benzoxadiazole | 156153-43-4 | C11H13ClN4O4S |
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| N-(4-硝基苯基乙酰氧基)琥珀酰亚铵 | N-succinimidyl 4-nitrophenylacetate | 68123-33-1 | C12H10N2O6 |
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| N,N'-二异丙基-O-(4-硝基苄基)异脲 | p-nitrobenzyl-N,N′-diisopropylisourea | 2978-11-2 | C14H21N3O3 |
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| 9-马来酰亚胺吖啶 | N-(9-acridinyl)maleimide | 49759-20-8 | C17H10N2O2 |
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| 9-溴甲基丫啶 | 9-(bromomethyl)acridine | 1556-34-9 | C14H10BrN |
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| 7-肼-N,N-二-4-苯并呋咱磺 | 4-(N,N-dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazole | 131467-86-2 | C8H11N5O3S |
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| 7-氟苯呋咱-4-硫氨 | 4-Aminosulfonyl-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole | 91366-65-3 | C6H4FN3O3S |
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| 6-[[7-(N,N-二甲氨基磺酰)-2,1,3-苯并恶二唑-4-基]氨基]己酸琥珀酰亚胺酯 | Succinimidyl 6-[[7-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl]amino]hexanoate | 1858255-08-9 | C18H23N5O7S |
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| 5-氨基荧光素 | fluoresceinamine | 3326-34-9 | C20H13NO5 |
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| 4-硝基-N-氯甲基邻苯二甲酰亚胺 | 2-(Chloromethyl)-4-nitro-1h-isoindole-1,3(2h)-dione | 54455-34-4 | C9H5ClN2O4 |
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| 4-硝基-7-肼基-2,1,3-苯并�f二唑 | 4-hydrazino-7-nitro-benzofurazan hydrazine | 131467-87-3 | C6H5N5O3*H4N2 |
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| 4-硝基-7-哌嗪苯并氧杂噁二唑 | 4-nitro-7-piperazino-2,1,3-benzoxadiazole | 139332-66-4 | C10H11N5O3 |
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| 4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑 | NBD chloride | 10199-89-0 | C6H2ClN3O3 |
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| 4-(N-氯甲酰甲基-N-甲氨基)-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑 | 4-(N-chloroformylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole | 140164-85-8 | C9H7ClN4O4 |
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| 4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-(2-乙二胺基)-2,1,3-苯并恶二唑 | 7-((2-aminoethyl)amino)-N, N-dimethylbenzo[c][1, 2, 5]oxadiazole-4-sulfonamide | 189373-41-9 | C10H15N5O3S |
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| 4-(N,N-二甲基胺磺酰基)-7-氟苯并呋喃 | 4-(N,N-dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole | 98358-90-8 | C8H8FN3O3S |
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| 4-(N,N-二甲基氨磺酰)-7-异硫氰酸基-2,1,3-苯并恶二唑 | 7-<(N,N-dimethylamino)sulfonyl>-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl isothiocyanate | 147611-81-2 | C9H8N4O3S2 |
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| 4-(N,N-二甲基氨基磺酰)-7-哌嗪苯并氧杂恶二唑 | 4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)- 7-Piperazino-2,1,3- Benzoxadiazole | 139332-64-2 | C12H17N5O3S |
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| 3-溴-7-甲氧基-1,4-氧氮杂萘-2-铜 | 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one | 124522-09-4 | C10H8BrNO3 |
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| 2-甲基丁烷 | methylbutane | 78-78-4 | C5H12 |
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| 2,4-二苯基-2-甲氧基-3(2H)-呋喃酮[用于高效液相色谱标记] | 2-methoxy-2,4-diphenyl-3-(2H)-furanone | 50632-57-0 | C17H14O3 |
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| 2,3-二氢-6-异硫氰基-1,4-酞嗪二酮 | isoluminol isothiocyanate | 107807-39-6 | C9H5N3O2S |
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| 1-苄基-3-对甲苯基三氮烯[用于酯化] | benzyl-(p-methylphenyl)triazene | 17683-09-9 | C14H15N3 |
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| 1-(4-硝基苯甲基)-3-对甲苯三氮烯 | 1-(4-Nitrobenzyl)-3-p-tolyltriazene | 60259-80-5 | C14H14N4O2 |
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| (R)-(-)-4-硝基-7-(3-氨基吡咯烷-1-基)苯并呋咱 | (R)-(-)-1-(7-Nitro-4-benzofurazanyl)-3-pyrrolidinamine | 143112-51-0 | C10H11N5O3 |
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| (1S,2S)-2-(蒽-2,3-二甲酰亚胺基)环己甲酸 | (1S,2S)-2-(anthracene-2,3-dicarboximido)cyclohexanecarboxylic acid | 446044-45-7 | C23H19NO4 |
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| (1S,2S)-2-(萘-2,3-二甲酰亚胺基)环己甲酸 | (1S,2S)-2-(2,3-naphthalenedicarboximido)cyclohexane carboxylic acid | 642995-16-2 | C19H17NO4 |
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| (1R,2R)-2-(蒽-2,3-二甲酰亚胺基)环己甲酸 | (1R,2R)-2-(2,3-anthracenedicarboximido)cyclohexanecarboxylic acid | 446044-44-6 | C23H19NO4 |
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| (1R,2R)-2-(萘基-2,3-甲酰亚胺基)环己烷羧酸 | (1R,2R)-2-(1,3-Dioxo-1H-benzo[f]isoindol-2(3H)-yl)cyclohexanecarboxylic acid | 642995-15-1 | C19H17NO4 |
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| —— | (Hydrazinocarbonyl)ferrocene [for HPLC Labeling] | 12153-28-5 | C11H22FeN2O |
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| —— | Elaiophylin | 37318-06-2 | C54H88O18 |
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| —— | fluorescein isothiocyanate | 18861-78-4 | C21H11NO5S |
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