摘要:
                                蛋白质聚集体是许多中枢神经系统疾病(例如polyQ扩张疾病)的特征。通过转谷氨酰胺酶的作用形成的共价键被认为参与了这些聚集体的稳定化。转谷氨酰胺酶催化在谷氨酰胺基和多肽的赖氨酰残基的侧链之间形成交联。在神经元聚集体的最终蛋白水解消化物中,对异肽N(ε)-(γ-谷氨酰基)赖氨酸(iEK)的鉴定将证明转谷氨酰胺酶参与了神经系统疾病。为了鉴定和量化神经系统疾病患者的大脑中存在的iEK,开发了一种结合液相色谱和多步质谱的方法。由于聚集蛋白的消化物中可能存在iEK的等压肽,因此片段诊断离子的选择至关重要。这些离子是通过在iEK上进行质谱鉴定而确定的,该iEK在羧基官能团和末端胺上进行了衍生化以提高灵敏度。氘代分子以及(13)C(6)-和(15)N(2)-同位素异构体用于在多步裂解中衍生纤丝。已经鉴定出主要的碎片模式,因此显示出两个离子(m / z 396 [MH-56-42 u](+)和350 [MH-56-88