to widespread caprolactam-based nylon-6. Chemical hydrolysis of monocyclic γ- and δ-lactams to the corresponding amino acids requires harsh reaction conditions and up to now, no mild (enzymatic) protocol has been reported. Herein, the biocatalytic potential of a pair of heterologously expressed bacterial ATP-dependent oxoprolinases – OplA and OplB – was exploited. Strong activity in the presence of
与较小的 β-内酰胺相比,中型 5 元和 6 元环内酰胺是具有显著稳定性的分子。作为单体,它们允许使用尼龙-4 和尼龙-5,它们是广泛使用的己内酰胺基尼龙-6 的替代聚酰胺。单环 γ-内酰胺和 δ-内酰胺
化学水解成相应的
氨基酸需要苛刻的反应条件,到目前为止,还没有温和的(酶)方案报道。在此,开发了一对异源表达的细菌
ATP 依赖性氧脯
氨酸酶 - OplA 和 OplB - 的
生物催化潜力。在
ATP 过量存在下,在 δ-戊内酰胺及其衍
生物上监测到强活性,而在 γ-丁内酰胺上检测到痕量活性。基于廉价格雷厄姆盐(
偏磷酸钠)和多
磷酸激酶的
ATP 回收系统允许使用催化量的
ATP,从而在 30 °C 下在
水性
培养基中完全转化 10 mM δ-戊内酰胺。通过使用 pETDuet1 载体共表达 OplA 和 OplB 获得了进一步的改进,这种策略提高了可溶性表达产量和蛋白质稳定性。最后,研究了一系列代替