作者:Songül Ulusoy、Halil Ibrahim Ulusoy、Daniel Pleissner、Niels Thomas Eriksen
DOI:10.1039/c5ra25854e
日期:——
The objective of this study was to characterize the nitrosation of the classical amino acids by N2O3. Nitrosation of amino acids results in the formation of mainly α-hydroxy-acids that are suitable for isocratic HPLC analysis and subsequent quantification of amino acids in biological samples. The method is particularly suitable for detection of amino acids in e.g. fermentation media as the α-hydroxy-acids
这项研究的目的是表征N 2 O 3对经典氨基酸的亚硝化作用。氨基酸亚硝化会形成主要为α-羟基的酸,这些酸适用于等度HPLC分析以及随后对生物样品中氨基酸的定量。该方法特别适用于检测例如发酵培养基中的氨基酸,因为α-羟基酸可以与多种其他有机底物和产物平行进行定量。氨基酸在酸性KNO 2中转化为相应的α-羟基酸解决方案。通过添加NaOH终止反应,并通过等度HPLC分离α-羟基酸,并通过折射率或UV吸收检测进行定量。对18种经典氨基酸进行亚硝化;甘氨酸,大号丙氨酸,大号-缬氨酸,大号l-亮氨酸,大号-异亮氨酸,大号-甲硫氨酸,大号-丝氨酸,大号-苏氨酸,大号天冬酰胺,大号谷氨酰胺,大号天冬氨酸,大号谷氨酸,大号-脯氨酸,L-半胱氨酸,L-苯丙氨酸,L-赖氨酸,L-酪氨酸和L-色氨酸形成可检测的亚硝化产物。然而,L-赖氨酸需要在96 mM甲酸中孵育才能产生可检测的产物,而L-苯丙氨酸必须在120