Site-Specific and Regiospecific Installation of Methylarginine Analogues into Recombinant Histones and Insights into Effector Protein Binding
作者:Daniel D. Le、Arianna T. Cortesi、Samuel A. Myers、Alma L. Burlingame、Danica Galonić Fujimori
DOI:10.1021/ja3108214
日期:2013.2.27
install methylarginine analogues on recombinant protein for use in biochemical, biophysical, and structural studies. Through chemical conjugation of novel α,β-unsaturated amidine precursors with proteins, methylarginine mimics can be displayed with control of methylation site, extent, and regiospecificity. Analogue installation into histones using this strategy produced modified proteins that were recognized
精氨酸甲基化已成为广泛的翻译后修饰,对无数细胞过程产生影响。然而,这种甲基精氨酸依赖性现象背后的分子机制仍不清楚。为了帮助这项研究,开发了一种简便的方法,将甲基精氨酸类似物安装在重组蛋白上,用于生物化学、生物物理和结构研究。通过新型 α,β-不饱和脒前体与蛋白质的化学偶联,甲基精氨酸模拟物可以通过控制甲基化位点、程度和区域特异性来展示。使用这种策略将类似物安装到组蛋白中产生了被内源性甲基精氨酸特异性抗体识别的修饰蛋白,并且这些组蛋白保留了形成单核小体的能力。而且,显示天然甲基精氨酸特异性结合域与甲基精氨酸类似物修饰的底物相互作用。这种用于安装甲基精氨酸类似物的化学缀合方法提供了一种生产均质修饰蛋白的有效途径,用于随后研究甲基精氨酸依赖性过程。