摘要:
胃蛋白酶的荧光底物;Dns-Ala-Phe-Trp-Val-Leu-OCH2Py 和 Dns-Phe-Trp-Val-Leu-OCH2Py 通过溶液法合成。胃蛋白酶与 Dns-Ala-Phe-Trp-Val-Leu-OCH2Py 孵育导致 Phe-Trp 键的特异性裂解和 345 nm 处荧光强度的时间依赖性增加,与底物水解程度平行。底物的最适 pH 值为 3.0,Km 和 kcat 值分别为 8.0×10-5 M 和 0.10 s-1。在 50 nM 到 500 nM 胃蛋白酶的范围内,在 50 μM 的底物浓度下,荧光强度与酶浓度的关系图的线性是令人满意的。由于其简单和快速,该方法可用于测量胃蛋白酶作用。相比之下,Dns-Phe-Trp-Val-Leu-OCH2Py 不会被胃蛋白酶切割。