Hexafluoro-2-propanol as a potent cosolvent for chemical ligation of membrane proteins
摘要:
膜蛋白的研究是一项重要挑战,这主要是因为它们在各种溶剂中的溶解性极差。传统的重组表达策略和天然化学连接方法都难以高效地产生足够数量的所需蛋白质。先前的研究表明,多氟化醇具有良好的难溶肽段溶解能力,尤其是六氟-2-丙醇(HFIP)。在本研究中,我们系统地研究了含有不同比例HFIP的溶剂对跨膜肽溶解能力的系统研究。通过HPLC和UV分析,我们得出结论,60% HFIP/8 M urea构成了一种良好的溶剂体系。在此溶剂体系中,我们还优化了进行天然化学连接(NCL)的条件。在优化的条件下,我们成功实现了二肽形成和模型蛋白质(Trifolitoxin)合成的NCL。这些结果表明,HFIP是一种潜在的共溶剂,可用于连接难溶肽段以生成膜蛋白。