通过核磁共振波谱研究帽结构在 mRNA 代谢中发挥其众多
生物学作用的机制需要大规模生产同位素标记的加帽 RNA。我们提出了一种生产含有帽结构 m7GpppA 的短 RNA 的有效方法,通过将
化学合成与使用 DNA 引物酶的酶促合成相结合。该方法用于合成三种加帽 RNA 分子,m7Gppp[13C,15N]A、m7Gppp[13C,15N]ACC 和 m7GpppA[13C,15N]C[13C,15N]C,它们含有选择性 13C,15N 标记的
腺苷或
胞嘧啶核苷酸。这种选择性标记技术使我们能够获得与真核翻译起始因子 4E (eIF4E) 复合的这些寡
核苷酸的
化学位移分配。此外,