high fluorescence quantum yields. This dye exhibits outstanding resistance to photoirradiation even under the STED conditions and allows continuous acquisition of STED images. Indeed, using a PB430-conjugated antibody, we succeed in attaining a 3-D reconstruction of super-resolution STED images as well as photostability-based multicolor STED imaging of fluorescently labeled cytoskeletal structures.
由于受激发射损耗 (STED) 显微镜可以提供超出衍射极限的光学分辨率的细胞结构细节,它已成为细胞
生物学中不可或缺的工具。然而,强烈的 STED 激光束通常会导致所用荧光
染料的快速光漂白,这从实际角度显着限制了 STED 显微镜的实用性。在此,我们报告了一种新设计的超光稳定
染料 PhoxBright 430 (PB430),它包含一个全环稠合的 π 共轭骨架和一个接受电子的
磷磷 P-氧化物单元。我们之前通过将
磷单元与供电子
三苯胺部分结合,开发了一种超耐光
染料 C-Naphox。在 PB430 中,
氨基的去除将转变类型从分子内电荷转移特征改变为 π-π* 转变特征,这产生在荧光颜色和强度方面对分子环境不敏感的强烈荧光,甚至在
水性介质中也产生明亮的荧光。PB430 还具有在
水中的高溶解度,并且能够以保持高荧光量子产率标记蛋白质。这种
染料即使在 STED 条件下也表现出出色的抗光辐射能力,并允许连续获取