我们报告了人 δ-
氨基
乙酰丙酸脱
水酶 (A
LAD) 的新测定,这是一种将 δ-
氨基
乙酰丙酸 (A
LA) 转化为胆色素原的酶。该检测方法用于临床诊断 δ-
氨基
乙酰丙酸脱
水酶缺乏性
卟啉症,这是一种罕见的血红素
生物合成途径酶缺乏症。该测定包括将红细胞裂解物与天然底物 A
LA 一起孵育,然后将胆色素原原位定量转化为丁酰胺,然后将液-液萃取到质谱仪友好的溶剂中。丁酰化胆色素原的定量通过电喷雾电离串联质谱法进行,使用
氘标记的内标。该测定很好地保持在其中 A
LAD 活性与时间呈线性关系的范围内。该ķ米A
LA 的 A
LAD 测量值为 333 μM,V max为 19.3 μM/h。36 名匿名个体的随机样本中的平均酶活性为 277 μmol/L 红细胞裂解物/小时,标准偏差为 90 μmol/L 红细胞裂解物/小时。串联质谱分析应该很容易检测酶缺乏,这会导致活性降低 95-99%。该测定显示出良好的重现性