摘要:
艰难梭菌中的基因eam编码的蛋白质与许多其他物种中的赖氨酸2,3-氨基变位酶(LAM)同源,但在梭状芽孢杆菌SB4亚末端的LAM中没有赖氨酰结合残基Asp293和Asp330。艰难梭菌蛋白在LAM中必需Asp残基的序列位置分别具有Lys和Asn。艰难梭菌基因已被克隆到大肠杆菌表达载体中,在大肠杆菌中表达,并纯化和鉴定了蛋白质。重组蛋白显示出作为谷氨酸2,3-氨基变位酶的优异活性,而对1-赖氨酸无活性。PLP,铁和硫化物含量以及紫外/可见光谱与LAM相似,该酶与SAM一样,需要SAM和连二亚硫酸盐作为活化剂。在1-谷氨酸存在下的冷冻-猝灭EPR实验揭示了在反应的稳态下基于谷氨酸的自由基。许多其他细菌基因组包括编码与艰难梭菌谷氨酸2,3-氨基变位酶同源的蛋白质的基因,这些蛋白质中有四个在大肠杆菌中产生时具有谷氨酸2,3-氨基变位酶的活性。所有同源蛋白均具有半胱氨酸基序CSMYCRHC,其对应于