[EN] AN ASSAY REAGENT AND A METHOD OF MAKING AND USING THE ASSAY REAGENT<br/>[FR] REACTIF D'ANALYSE, PROCEDE DE PRODUCTION ET MODE D'EMPLOI_______
申请人:COULTER INTERNATIONAL CORP.
公开号:WO1996036729A1
公开(公告)日:1996-11-21
(EN) An assay compound or a salt thereof for assaying the activity of an enzyme inside a metabolically active whole cell is disclosed. The assay compound includes a leaving group and an indicator group. The leaving group is selected from the group comprising amino acids, peptides, saccharides, sulfates, phosphates, esters, phosphate esters, nucleotides, polynucleotides, nucleic acids, pyrimidines, purines, nucleosides, lipids and mixtures thereof. The indicator group is selected from compounds which have a first state when joined to the leaving group, and a second state when the leaving group is cleaved from the indicator group by the enzyme. Preferably, the indicator compounds are rhodamine 110, rhodol, and fluorescein and analogs of these compounds. A method of synthesizing the compound as well as methods of using these compounds to measure enzyme activity are also disclosed.(FR) L'invention porte sur un composé d'analyse ou un sel de celui-ci permettant d'analyser une activité enzymatique dans l'ensemble d'une cellule active au plan du métabolisme. Ce composé comporte un groupe partant et un groupe indicateur. Le groupe partant est choisi dans le groupe comprenant des acides aminés, des peptides, des saccharides, des sulfates, des phosphates, des esters, des esters phosphoriques, des nucléotides, des polynucléotides, des acides nucléiques, des pyrimidines, des purines, des lipides ainsi que des mélanges de ces constituants. Le groupe indicateur est choisi dans des composés présentant un premier état lorsqu'ils sont unis au groupe partant et un second état lorsque le groupe partant est coupé du groupe indicateur par l'enzyme. Les composés indicateurs sont, de préférence, la rhodamine 110, le rhodol ainsi que la fluorescéine et des analogues de ces composés. L'invention porte également sur un procédé permettant de faire la synthèse du composé ainsi que sur des techniques d'utilisation de ces composés visant à mesurer une activité enzymatique.