Synthesis of magnetic nanoparticles with an IDA or TED modified surface for purification and immobilization of poly-histidine tagged proteins
作者:Kai Zeng、En-Jie Sun、Ze-Wen Liu、Junhui Guo、Chengqing Yuan、Ying Yang、Hao Xie
DOI:10.1039/c9ra10473a
日期:——
nanoparticles (MNPs) chelating with metal ions can specifically interact with poly-histidine peptides and facilitate immobilization and purification of proteins with poly-histidine tags. Fabrication of MNPs is generally complicated and time consuming. In this paper, we report the preparation of Ni(II) ion chelated MNPs (Ni-MNPs) in two stages for protein immobilization and purification. In the first stage
与金属离子螯合的磁性纳米粒子 (MNP) 可以与多组氨酸肽特异性相互作用,并促进具有多组氨酸标签的蛋白质的固定和纯化。MNP的制造通常是复杂且耗时的。在本文中,我们报告了 Ni( II ) 离子螯合 MNPs (Ni-MNPs) 的制备分两个阶段用于蛋白质固定和纯化。在第一阶段,有机配体包括五齿三(羧甲基)乙二胺(TED)和三齿亚氨基二乙酸(IDA)和无机Fe 3 O 4 –SiO 2MNPs是单独合成的。在下一阶段,将配体接枝到 MNPs 的表面,并获得具有 TED 或 IDA 改性表面的 MNPs,然后与 Ni( II ) 离子螯合。镍(Ⅱ) 离子螯合形式的 MNP (Ni-MNP) 的特征包括形态、表面电荷、结构、尺寸分布和磁响应。以his标记的糖苷水解酶DspB(Dispersin B)为蛋白质代表,证实了DspB和Ni-MNP之间的特异性相互作用。与商业 Ni-NTA 相比,在 DspB