1-(3-Chloro-4-fluorophenyl)-4-[(5-nitrofuran-2-yl)methylidene]pyrazolidine-3,5-dione | 423148-78-1

• 物质功能分类: 生物化工 - 生化试剂 - 激动剂抑制剂
• 分子结构分类: 有机化合物 - 有机杂环化合物 - 呋喃
• 英文名称: 1-(3-Chloro-4-fluorophenyl)-4-[(5-nitrofuran-2-yl)methylidene]pyrazolidine-3,5-dione
• 英文别名: 1-(3-chloro-4-fluorophenyl)-4-[(5-nitrofuran-2-yl)methylidene]pyrazolidine-3,5-dione
• CAS: 423148-78-1
• 化学式: C14H7ClFN3O5
• 分子量: 351.67
• InChiKey: MSYMKEYWUWVZQY-UHFFFAOYSA-N

物化性质

• 密度：
  1.662±0.06 g/cm3(Predicted)
• 溶解度：
  溶于二甲基亚砜

计算性质

• 辛醇/水分配系数(LogP)：
  2.8
• 重原子数：
  24
• 可旋转键数：
  2
• 环数：
  3.0
• sp3杂化的碳原子比例：
  0.0
• 拓扑面积：
  108
• 氢给体数：
  1
• 氢受体数：
  6

制备方法与用途

生物活性

PYZD-4409 是 ubiquitin-activating enzyme UBA1 的特异性抑制剂，其 IC50 值为 20 μM。该化合物能诱导恶性细胞死亡，并优先抑制原发性急性髓性白血病细胞的生长。

靶点

IC50: 20 μM (ubiquitin-activating enzyme UBA1)

体外研究

PYZD-4409（10-40 μM；72 小时；多发性骨髓瘤、白血病和实体肿瘤细胞系，原代急性髓性白血病细胞和正常造血细胞）诱导细胞死亡，并在5/8的白血病和多发性骨髓瘤细胞系中，在不到10 μM 的剂量下即能产生半数有效浓度 (LD₅₀)。相比之下，实体肿瘤细胞系相对不敏感，其 LD₅₀ 约为 15 到20 μM。PYZD-4409 对恶性细胞的毒性明显高于正常造血细胞。

在 K562 白血病细胞中（50 μM；4 小时），PYZD-4409 阻断了 E1 依赖的泛素与 E2 蛋白酶 cdc34 的连接。同样，在 K562 白血病细胞中（0-25 μM；24 小时），PYZD-4409 显著增加了 Grp78 和 Hsp70 的 mRNA 和蛋白质水平，并上调了磷酸化 JNK 和 p38 丝裂原活化蛋白激酶的水平，这些变化与内质网应激和未折叠蛋白反应相关。

细胞毒性测定

• 细胞系：多发性骨髓瘤、白血病和实体肿瘤细胞系，原代急性髓性白血病细胞和正常造血细胞
• 浓度：10 μM, 20 μM, 30 μM, 40 μM
• 孵育时间：72 小时
• 结果：在5/8的白血病和多发性骨髓瘤细胞系中诱导了细胞死亡，半数有效浓度 (LD₅₀) 小于10 μM。相比之下，实体肿瘤细胞系相对不敏感，其 LD₅₀ 约为 15 到20 μM。

蛋白质印迹分析

• 细胞系：K562 白血病细胞
• 浓度：50 μM
• 孵育时间：4 小时
• 结果：阻断了 E1 依赖的泛素与 E2 蛋白酶 cdc34 的连接。

RT-PCR

• 细胞系：K562 细胞
• 浓度：0 μM, 10 μM, 25 μM
• 孵育时间：24 小时
• 结果：显著增加了 Grp78 和 Hsp70 的 mRNA 和蛋白质水平。

体内研究

PYZD-4409（10 mg/kg；腹腔注射；隔日一次，共16天；雄性严重联合免疫缺陷 (SCID) 小鼠）降低了肿瘤重量和体积且未产生不良毒性。动物模型：带有 MDAY-D2 墨鱼多发性骨髓瘤细胞的雄性 SCID 小鼠。给药方式：腹腔注射；隔日一次，共16天。结果：延迟了肿瘤生长并减少了肿瘤重量，未见不良反应。