摘要:
全化学合成提供了一种独特的方法来获得未受污染的、单分散的,更重要的是,翻译后修饰的膜蛋白。在本研究中,我们报告了一种通过使用自动化 Fmoc 化学以方便且经济高效的方式合成数毫克规模的中小型膜蛋白的实用程序。我们研究的主要发现是,在连接了一个可去除的精氨酸标签骨架修饰基团后,膜蛋白片段在 Fmoc 固相合成、连接、纯化和质量方面的表现几乎与普通水溶性肽相同。光谱表征。从甲型流感病毒和内向整流器 K(+) 通道蛋白 Kir5.1 的膜嵌入域中成功制备了 Ser64 磷酸化 M2 质子通道,证明了新方法的效率和实用性。这些化学合成的膜蛋白的功能表征表明它们为生物化学和生物物理学研究提供了有用且难以获得的材料。