[EN] REAGENTS AND METHODS FOR THE DETERMINATION OF GLYCOHYDROLYTIC ENZYMES
申请人:ABBOTT LABORATORIES
公开号:WO1993015097A1
公开(公告)日:1993-08-05
(EN) Novel pyrene-trisulfonate derivatives and the use thereof in a method for the determination of glycohydrolitic enzyme activity are provided. The method comprises the steps of (a) forming a test solution comprising a test sample containing the glycohydrolitic enzyme and a pyrene-trisulfonate derivative of the present invention, wherein the derivative is hydrolyzed by the glycohydrolytic enzyme to result in the formation of free 8-hydroxy-1,3,6-pyrene trisulfonate as a function of, and which can be correlated to, the amount of the glycohydrolytic enzyme present in the test sample, and (b) measuring and correlating either the intensity of fluorescence, or the optical density, of the test solution to the presence or amount of the glycohydrolytic enzyme in the test sample. A preferred pyrene-trisulfonate derivative is pyrene-(1,3,6-trisulfonic acid)-8-$g(b)-D-glucuronide for the determination of $g(b)-D-glucuronidase for the diagnosis of periodontal disease.(FR) L'invention concerne de nouveaux dérivés de trisulfonate de pyrène et leur utilisation selon un procédé de détermination de l'activité d'une enzyme glycohydrolytique. Le procédé consiste à (a) préparer une solution à examiner comprenant un échantillon à examiner contenant l'enzyme glycohydrolytique et un dérivé de trisulfonate de pyrène selon la présente invention, ce dérivé étant hydrolisé par l'enzyme glyclohydrolitique pour former un trisulfonate libre de 8-hydroxy-1,3,6-pyrène qui est fonction de la quantité d'enzyme glycohydrolytique présente dans l'échantillon à analyser et qui peut être mise en corrélation avec ladite quantité; et (b) à mesurer soit l'intensité de la fluorescence, soit l'intensité optique de la solution à analyser et à mettre en corrélation la valeur obtenue avec la présence ou la quantité d'enzyme glycohydrolytique dans l'échantillon à analyser. Un dérivé préféré de trisulfonate de pyrène est un pyrène-(acide 1,3,6-trisulfonique)-8-$g(b)-D-glucuroconjugué utilisé pour la détermination de l'activité de la $g(b)-D-glucoronidase dans le diagnostic d'une paradontolyse.