最近引入了荧光鳍状探针来对活细胞中的膜张力进行成像,并且正在出现将这些探针靶向特定膜的策略。在这种情况下,不使用蛋白质工程的早期内体 (EE) 靶向特别有吸引力,因为它转化为一个迷人的运输问题。通常用于追踪酸性晚期内体和溶酶体内部的弱碱性探针在 EE 中的保留很差,因为它们在弱酸性 EE 中被充分中和,从而能够扩散出去。在这里,我们公开了一种使用具有更高 p K a的取代苄胺靶向 EE 的合理策略值作为鳍状探针的头组。由此产生的 EE 鳍状肢经过验证,具有保留的机械敏感性,可用于生物学,特别是阐明内吞作用的机制。