摘要:
本文中,我们报告了含有表面固定酶的总分析微系统的制造,表征和使用。链霉亲和素缀合的碱性磷酸酶与涂在聚二甲基硅氧烷微通道和硼硅酸盐微毛细管内部的生物素化磷脂双层相连。通过在芯片上进行层流控制的稀释,可以快速测定多种底物浓度下的酶动力学。这使得Lineweaver-Burk分析可以从单个实验中同时收集所有数据进行。结果显示该异构系统的酶转换数为51.1 +/- 3.2 s(-1)。此外,扩展了相同的酶固定策略,以证明通过串联固定各种酶可以依次进行多种化学反应。具体地,通过使用固定的抗生物素蛋白D缀合的葡萄糖氧化酶和抗生蛋白链菌素缀合的辣根过氧化物酶的两个偶联步骤来检测葡萄糖的存在。