[EN] A METHOD OF DETECTING AND SEPARATING SERUM GAMMA-GLUTAMYL TRANSFERASE (GGT) ISOFORMS IN A SAMPLE OF BIOLOGICAL FLUID AND THE ENZYME ISOFORMS THEREBY OBTAINED<br/>[FR] PROCÉDÉ DE DÉTECTION ET DE SÉPARATION D'ISOFORMES DE GAMMA-GLUTAMYL TRANSFÉRASE (GGT) SÉRIQUES DANS UN ÉCHANTILLON DE FLUIDE BIOLOGIQUE ET ISOFORMES D'ENZYMES AINSI OBTENU
申请人:UNIV PISA
公开号:WO2009001290A2
公开(公告)日:2008-12-31
(EN) A method is described for detecting the gamma-glutamyl transferase enzyme isoforms (GGT, EC 2.3.2.2) in a sample of biological fluid, such as for example plasma or serum. The method comprises an HPLC separation step of the sample proteins based on the molecular size and a second step for detecting the GGT isoforms by post-column reaction with a GGT enzyme substrate capable of generating a detectable final product, preferably by spectrophotometric or fluorimetric means. The GGT isoforms can be separated by ultra-centrifugation, thereby obtaining three enzymatic isoforms characterised by molecular weights of approximately 2000, 940, and 140 KDa, respectively.(FR) La présente invention concerne un procédé de détection et de séparation d'isoformes de gamma-glutamyl transférase (GGT, EC 2.3.2.2) sériques dans un échantillon de fluide biologique, tel du plasma ou du sérum. Le procédé comprend une étape de séparation HPLC des protéines de l'échantillon en fonction de la taille moléculaire et une seconde étape consistant à détecter les isoformes de GGT par réaction post-colonne avec un substrat d'enzyme GGT capable de générer un produit final susceptible d'être détecté, de préférence par spectrophotométrie ou fluorimétrie. Les isoformes GGT peuvent être séparés par ultracentrifugation, ce qui permet d'obtenir trois isoformes enzymatiques caractérisés respectivement par des poids moléculaires d'environ 2000, 940 et 140 KDa.